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Western Blot 特辑---期刊杂志对WB发表要求

Western Blot 特辑---期刊杂志对WB发表要求 基因快讯
2016-07-01
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导读:Western Blot, 又称免疫印迹,是分子生物学、生物化学和免疫遗传学中常用的一种实验方法,被广泛应用
Western Blot, 又称免疫印迹,是分子生物学、生物化学和免疫遗传学中常用的一种实验方法,被广泛应用于检测细胞或者组织样本中蛋白的表达量。
Western Blot实验中许多手动步骤都容易引起变量和结果的不准确性,因此通过减少引起变量的来源获取可信赖、可重复的高质量数据有非常重要的意义,同时也能为文章发表、经费申请奠定良好的基础。期刊杂志方面也对Western Blot文章的要求越来越严,越来越多的编辑要求投稿人提供完整的实验细节,如抗体的验证数据、方法、原始图片以及定量分析。  
在此我们与您一起分享主流期刊杂志(包括Cell、CellPress、The Journal of Biological Chemistry、The Journal of Cell Biology、 Molecular Biology of the Cell、Nature、 Science 等)对Western Blot文章发表的要求,为您能更好地获取Western Blot数据,更高效、快速地发表文章提供一些参考。期刊杂志对Western Blot的要求可总结为两大类:数据获取,数据展示。
数据获取:
抗体验证2,5-6
对抗体的特异性、种属、来源进行验证

定量2,4-5

目标蛋白、参照蛋白信号在合适的线性范围内 

重复性2-3,5

展示包括重复性和误差线等统计学信息
数据展示:
图像处理1-7
对整个图像进行明亮度、对比度、色彩平衡处理
不能因为调节背景而导致数据丢失

图像裁剪1-7

清楚地标明膜拼接、裁剪边界
在目的条带上/下方展示Marker 分子量
要包含阳性和阴性对照
LI-COR公司的Odyssey双色红外激光成像系统采用近红外荧光染料技术,产生稳定荧光信号,且信号与目标蛋白丰度成很好的线性比例关系,因此定量更准确、重复性更高(详见图一)。
在蛋白修饰(如磷酸化修饰)等研究中需要同时检测两种或以上蛋白时,传统的化学发光法往往会采用Stripping和Reprobing 的办法,这种办法因可能存在过度Stripping和Stripping不足而导致出现准确性低和重复性低的问题。而Odyssey双色红外激光成像系统的双色成像功能可以在同等条件下同时检测多种目标物质,避免了Stripping和Reprobing ,结果更准确,重复性更高。
图二:同一张膜上同时检测两种蛋白

Odyssey双色红外激光成像系统具有定量准确、线性动态范围宽、多重检测、背景更低等特点,结果更准确,重复性更高,已成为国内外很多蛋白质研究者的主流选择。关于Odyssey双色红外激光成像系统的详细信息,请点击阅读原文,参考本公众号另外一篇文章:蛋白质研究的一盏神灯。


References
1.  “Cell Press Digital Image Guidelines.” Cell. CellPress. Web. 3 March 2016.
2.  “Instructions for Authors.” The Journal of Biological Chemistry. American Society for Biochemistry and Molecular Biology. Web. 3 March 2016.
3.  “Instructions for Authors.” The Journal of Cell Biology. The Rockefeller University Press. Web. 3 March 2016.
4.“Instructions for Authors.” Molecular Biology of the Cell. The American Society for Cell Biology, 24 February 2016. Web. 3 March 2016.
5.  “Image Integrity.” Nature. Macmillan Publishers Limited, 2016. Web. 3 March 2016.
6.  “Figures.” PLoS. Web. 3 March 2016.

7.  “Instructions for preparing an initial manuscript.” Science. American Association for the Advancement of Science. Web. 3 March 2016. 


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