在Western Blot 实验中,经常会出现高背景的问题,不仅影响视觉体验,还会影响实验结果的准确性。抗体洗脱不干净是一方面,封闭效果不好也是导致高背景至关重要的一个原因。因此封闭液的选择对免疫反应至关重要。合适的封闭液可以降低背景干扰,增加信噪比,提高灵敏度,促进一抗的特异性结合,同时降低非特异性交叉反应。
❖ 封闭不足会带来高背景,降低信噪比
❖ 过度封闭有可能会带来目的信号的丢失,或影响抗原抗体反应
❖ 没有一种封闭液是“万能的”适合于所有的抗原抗体
❖ 封闭液的选择可能会影响抗体的特异或者非特异结合
LI-COR提供了多种用于Odyssey®成像系统的封闭缓冲液。Intercept®封闭缓冲液经过优化,可与IRDye®产品和其他近红外荧光团配合使用。它们通过减少背景干扰、提高信噪比和促进一抗的特异性结合同时最大限度地减少非特异性相互作用来提高灵敏度。
Intercept Blocking Buffers
此外,Intercept Blocking Buffers还可用于化学发光实验的封闭步骤,稀释HRP偶联的二抗。Intercept Blocking Buffers不含叠氮化钠,它们还可用于:
❖ 化学发光蛋白质印迹检测
❖ In-Cell Western
❖ In-Gel Western
❖ Protein Array
❖ Glycoprotein Detection
Intercept Protein-Based Blocking Buffers
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不含哺乳动物蛋白,与哺乳动物抗体的交叉反应性最低
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即用型配方
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同时也可用于化学发光检测、In-Cell Western等实验
Intercept Protein-Free Blocking Buffers
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不含蛋白质封闭液,适合于不能包含动物蛋白系统的实验中
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适用于最大程度降低动物来源样本及抗体的交叉反应可能性
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即用型配方
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同时也可用于化学发光检测、In-Cell Western等实验
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