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高质量考染胶图?选择百晶成像!

高质量考染胶图?选择百晶成像! 基因快讯
2024-11-20
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导读:使用百晶G520M和Eagle Chemi多功能成像分析系统,得到高质量考染胶图!!

考马斯亮蓝染色


考马斯亮蓝染色(Coomassie Brilliant Blue staining)是一种在实验室中广泛使用的蛋白质染色方法,主要用于在聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)后对分离的蛋白质进行可视化。
在实验室中,考马斯亮蓝染色因其快速、简便、低成本和高重现性而被广泛使用。

实验原理


考马斯亮蓝染色的原理基于染料与蛋白质之间的相互作用。染料分子带有负电荷,与蛋白质中的疏水氨基酸残基及SDS处理后的负电荷区域结合,形成蓝色复合物。这种结合主要通过电荷相互作用、疏水相互作用以及氢键和范德华力实现。染色过程中,考马斯亮蓝染料与蛋白质紧密结合,使得蛋白质条带在凝胶上清晰可见,便于后续的分析和定量。

实验简要步骤


①凝胶准备:

准备蛋白质样品的SDS-PAGE电泳。

②染色前处理:

用去离子水冲洗凝胶去除SDS和电泳缓冲液。若凝胶上有琼脂糖也需去除。

③染色液准备:

通常配方为0.1% Coomassie Brilliant Blue G-250在50%甲醇和10%冰醋酸的溶液中。

④染色:

将凝胶浸入染色液中,摇床震荡确保凝胶与染色液充分接触。染色时间可以从30分钟到几小时不等,具体取决于蛋白质的量和染色液的浓度。

⑤染色增强(可选)

为了增强染色效果,可以将染色后的凝胶在染色液中加热,例如在微波炉中加热30秒到1分钟。

⑥脱色:

染色完成后用脱色液(通常为10%甲醇和7%冰醋酸的溶液)替换染色液进行脱色,直到背景清晰,蛋白质条带明显。

⑦存储凝胶:

如果需要,可以将成像后的凝胶保存在脱色液中,以防止染料进一步扩散。

⑧注意事项

操作时应穿戴适当的个人防护装备,如手套和护目镜,因为染色液和脱色液可能对皮肤和眼睛有刺激性。

考染胶成像


脱色完成后,可以使用百晶G520M和Eagle Chemi多功能成像分析系统,得到高质量考染胶图!!


考染胶成像结果展示



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