是在IHC基础上,基于酪酰胺信号放大(TSA,Tyramide signal amplification)技术,实现的同一张切片的多指标荧光检测。
荧光素标记酪酰胺(Tyramide)在二抗携带的HRP酶促作用下,生成活化荧光底物与靶标蛋白的酪氨酸共价结合,从而使靶标蛋白标记上特定的荧光;
随后通过加热剥离洗去非共价结合的抗体,再重复操作换下一个指标的一抗,搭配另一种荧光素标记的Tyramide进行染色;
如此往复可在同一张切片上实现双标三色或更多指标的同时分析。
mIHC必备单品
- 荧光标记的Tyramide即用型 -
不同组织切面的面积不同,以覆盖样品最佳,通常直接滴加 1-2 滴在切片上(50~100uL/Test),覆盖所有组织或细胞即可,即1mL对应检测样本数量是10-20T,因此2mL是20-40T,5mL是50-100T,10ml是100-200T。
2) 525、555、594 标记在镜下为不同程度的红色,请使用专门成像仪器和分析软件区分光谱。使用全光谱成像系统可以拆分单独光谱实现 6 色以上成像。
3) 可通过常规染色进行预实验确定指标的表达丰度,通常优先染色表达量高的指标,后染色表达量低的指标。
4) 可使用通用公开配方对切片进行脱蜡和抗原修复,或者采购我们的修复液。

