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技术文章 | 教你培养CTLL-2 攻略学起来

技术文章 | 教你培养CTLL-2 攻略学起来 金源康生物
2024-02-04
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导读:CTLL-2细胞来自于小鼠,是一种小鼠T细胞淋巴瘤细胞系。

       CTLL-2细胞来自于小鼠,是一种小鼠T细胞淋巴瘤细胞系。该细胞系最初由中村伸一博士于1975年从BALB/c小鼠的淋巴瘤中建立,并被广泛应用于免疫学研究中。CTLL-2细胞具有激素依赖性,需要外源性的IL-2(白介素2)来维持其生长和增殖。这使得CTLL-2细胞在研究IL-2的生物学功能和效应方面具有很高的应用价值。

        关于CTLL-2细胞培养,小编整理了一份培养攻略,供各位小伙伴参考。









一、CTLL-2细胞信息











名       称小鼠T细胞


来       T细胞


细胞形态:淋巴母细胞


生长特性:悬浮生长


培养体系:RPMI 1640 + 10% FBS + 100U/ml rmIL-2 + 1.0ug/ml ConA + 1% P/S


传代比例:3~8×105cells/mL


换液周期:2~3次/周


生长条件:95%空气,5%CO2,37℃


冻存条件:70% 基础培养基 + 20% FBS + 10% DMSO









细胞复苏及传代


1、细胞复苏


(1)将细胞冻存管在37℃水浴中轻轻摇晃,迅速解冻,使细胞悬液完全融化。

(2)将完全融化的细胞悬液直接离心,或者转移至无菌15mL或其它合适无菌离心管中,1000rpm离心5min,吸除上清,注意不要吸走细胞沉淀,然后用新鲜完全培养液重悬后转移至培养器皿,混匀,置于CO2培养箱37℃培养。


2、细胞传代


当CTLL-2细胞密度达到80~90%,即可进行传代


方法一:收集CTLL-2细胞于无菌离心管中,1000rpm离心5min,吸除上清液,注意不要吸走细胞沉淀,补加2mL新鲜培养液,吹匀后做细胞计数,根据细胞计数结果进行传代(或者按照一定的分种比例进行传代),将细胞悬液加到含有新鲜培养液的培养器皿中,混匀后,置于CO2培养箱37℃培养。


方法二:将CTLL-2细胞液混匀,取样做细胞计数,根据细胞计数结果,取一定量的细胞悬液加入到新的培养器皿中,再补充新鲜培养液,混匀后,置于CO2培养箱37℃培养;或者将混匀后的细胞悬液,按照一定的分种比例直接进行传代。

三、CTLL-2细胞特性


1、IL-2依赖性:CTLL-2细胞对白细胞介素-2(IL-2)的生长依赖性非常高。IL-2的存在对于CTLL-2细胞的生长和存活是必需的。


2、NK细胞特征:CTLL-2细胞表现出一些自然杀伤细胞(NK细胞)的特征。它们能够杀伤肿瘤细胞,并产生多种促炎细胞因子,如干扰素γ(IFN-γ)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)。


3、极化细胞类型:CTLL-2细胞在体外培养中是极化的细胞类型,在细胞表面表达大量的IL-2受体(IL-2R),并且能够对IL-2的刺激做出快速的反应。


4、成熟的T细胞特征:CTLL-2细胞具有一些成熟的T细胞特征,包括表达CD3、CD4和CD8等T细胞标志物。


5、Treg细胞特性:CTLL-2细胞也被认为具有一些调节性T细胞(Treg细胞)的特征,能够产生调节性细胞因子以及调节其他免疫细胞的活动。


6、多功能性:CTLL-2细胞能够表达多种免疫相关分子和受体,如细胞因子、共刺激分子和细胞黏附分子等。


总之,CTLL-2细胞是一种多功能的细胞系,具有IL-2依赖性、NK细胞特征、极化细胞类型、成熟的T细胞特征以及可能的Treg细胞特性。这些特性使得CTLL-2细胞成为研究IL-2信号通路、免疫细胞功能、肿瘤免疫和新药筛选等领域的理想模型。



【声明】内容源于网络
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金源康生物是一家专注动物血清、培养基、疫苗佐剂、细胞库及周边产品等研发与生产应用的国家级高新技术企业,奥普赛生物为金源康所属子品牌。咨询热线:400-880-5811,官方网址:www.nmjyk.com
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