
近几年的研究显示,人脐带中存在大量的MSCs,与其他来源相比,人脐带间充质干细胞(human umbilical
cord
meseneymal
stem
cells,hUC-MSCs)更加易于获得,对母子均无损伤,且冻存和复苏后细胞的生物学性状无明显变化,使其成为细胞治疗中的理想细胞。本文将简单介绍hUC-MSCs的分离、提取、培养和鉴定的方法。
一般选取无菌剖宫产的新鲜脐带约10cm,用PBS溶液清洗脐带,去除残留血液,将脐带剪成小段后再次用PBS漂洗,纵向剖开脐带,剔除脐带血管,剥离华通胶,再用眼科剪将华通胶剪碎成1mm3左右的小块,转移至细胞培养瓶中,加入含有10%FBS和1%P/S的DMEM/F12培养液,将培养瓶置于5%CO2、37℃的培养箱中静置培养。培养1周后,进行换液处理,之后每3~4d换液1次。待细胞长至80%~90%汇合度时,进行传代。
原代细胞培养成功后,即可进行正常传代操作,一般可选用DMEM/F12+10%FBS+1%P/S的培养体系进行培养,根据细胞生长状态选择合适的传代比例进行传代。
hUC-MSCs的鉴定可以选用流式细胞仪检测。以往的研究表明,成熟的hUC-MSCs能够高表达CD29、CD44、CD73、CD90、CD105、CD106等膜表面标记物,不表达CD14、CD34、CD45等造血干细胞标志抗原。若检测结果显示hUC-MSCs高度表达CD29、CD44、CD90、CD105,几乎不表达造血干细胞标志物,与骨髓来源MSCs具有相似的免疫表型,即可表明该细胞属于hUC-MSCs细胞。
综上所述,脐带间充质干细胞(MSCs)具有较高的分化潜能,可向多个方向进行分化。它在骨、软骨、肌肉、肌腱、韧带、神经、肝、内皮和心肌等组织工程方面具有广阔的临床应用前景,并且具有取材方便,无伦理学争议等优点,因此越来越受到研究工作者们的关注。

