自然杀伤细胞（NK cell）是人体先天免疫系统的重要细胞毒性淋巴细胞，与抗肿瘤、抗病毒感染和免疫调节有关。近20年来，基于NK细胞治疗的研究发展迅猛，成为免疫治疗创新的又一明星。根据Nature上的一项报道，截止2022年4月15日，全球共有2765项肿瘤免疫细胞疗法处于研发阶段，其中NK细胞疗法连续2年以较高速度增长，21年增长率65%，22年增长率55%[1]。相较于目前最为热门的嵌合抗原受体（CAR）T细胞疗法，NK细胞疗法具有下列优势：
（1）由于NK细胞不需要经过抗原呈递激活，利用CAR-NK细胞治疗起效较快；
（2）NK细胞由于不需要肿瘤特异性识别，而且不会被细胞表面组织相容性复合物（MHC）抑制，具有更为广泛的活性，使得NK细胞能够发挥更为广泛的抗癌功效，不仅适合作为基因编辑的工程细胞疗法，同时也适合单独扩增回输；
（3）NK细胞疗法较CAR-T细胞疗法更为安全，CAR-T容易引起致命的细胞因子释放综合征（CRS）和移植物抗宿主病（GVHD）；
（4）NK细胞具有开发通用型、即用型疗法的潜力，能够缩短危重症患者的等待周期。
目前临床上开展试验的NK细胞来源较为广泛，包括外周血NK细胞、脐带血NK细胞、干细胞衍生NK细胞、细胞因子诱导的记忆样NK细胞和CAR-NK细胞等[2]。研究发现，随着年龄增长，人体中的NK细胞的增殖潜力、表型和功能同步衰减，与年轻组（＜41岁）的NK细胞类群、表型和功能具有显著的差别[3]，未来不论是出于回输NK增强自身免疫还是不幸罹患肿瘤等恶性疾病需要NK细胞治疗，外周血来源的NK细胞存储均应该早做打算。当然，脐带血作为一种宝贵的资源，已被临床用于治疗血液系统恶性肿瘤、自身免疫疾病等，脐带血相比成人干细胞，具有更高的活性，更低的免疫源性等优势；研究还表明，脐带血中NK细胞数量占全部脐带血淋巴细胞总数的30%左右，而在外周血中的比例仅为10%左右，是保存NK细胞的另一种推荐选择[4]。
研究人员就脐带血来源NK细胞冻存进行探究，结果发现，经过冻存的脐带血来源NK细胞不仅具有较高的复苏活率，而且细胞标志物表达与冻存前的NK细胞无显著差异，提示脐血来源的NK细胞冻存是可行性的。最后研究人员还表示，经过冻存的脐血来源NK细胞相比新鲜的脐血来源NK以及外周血来源NK细胞均可发挥灭杀肿瘤细胞的功能，并且相较于外周血NK细胞，经过冻存复苏的NK细胞表现出更好的体外增殖、更强的干扰素γ（IFN-γ）以及CD19表达[5]。国内研究报道经过深低温冻存的脐血来源NK细胞活性显著提高，同样支持深低温冻存脐血来源NK细胞[6]。最后，另一项研究中，研究人员同样证实长期冻存对于脐带血来源NK细胞的增殖能力、抗肿瘤活性没有影响，同时在攻击原发性乳腺癌细胞时特别有效[7]。
2017年，研究人员针对多发性骨髓瘤开展了脐带血来源NK细胞治疗I期临床试验，10名患者获得了非常好的部分缓解，其中8名患者接近完全缓解或更好[8]。展现出NK细胞除了抵抗乳腺癌肿瘤细胞外，还能够作用于其他种类的癌症细胞。最后，伴随着CAR技术的成熟，基于CAR-NK细胞疗法也展现出了其良好的治疗前景，研究人员对脐带血来源的NK细胞进行了CAR修饰，随后用于治疗用于治疗复发或耐药性慢性淋巴细胞性白血病、急性淋巴细胞性白血病或非霍奇金淋巴瘤，在动物模型上取得良好的治疗效果，并表明基因修饰脐带血来源的NK细胞为同种异体免疫治疗提供了一种容易制备、疗效惊人且安全性高的途径[9]。
由于现代生物冻存技术的成熟，使得从脐带血中提取并深低温长期储存NK细胞成为可能。基于NK细胞疗法发挥抗病毒、抗衰老、预防肿瘤甚至治疗癌症功效，脐带血NK细胞储存将会是人生健康的一份重要投资和保障！
[1] Saez-Ibañez A R, Upadhaya S, Partridge T, et al. Landscape of cancer cell therapies: trends and real-world data[J]. Nature reviews. Drug discovery, 2022,21(9):631-632.
[2] Myers J A, Miller J S. Exploring the NK cell platform for cancer immunotherapy[J]. Nature reviews. Clinical oncology, 2021,18(2):85-100.
[3] Gounder S S, Abdullah B, Radzuanb N, et al. Effect of Aging on NK Cell Population and Their Proliferation at Ex Vivo Culture Condition[J]. Anal Cell Pathol (Amst), 2018,2018:7871814.
[4] Luevano M, Daryouzeh M, Alnabhan R, et al. The unique profile of cord blood natural killer cells balances incomplete maturation and effective killing function upon activation[J]. Human Immunology, 2012,73(3):248-257.
[5] Domogala A, Madrigal J A, Saudemont A. Cryopreservation has no effect on function of natural killer cells differentiated in vitro from umbilical cord blood CD34+ cells[J]. Cytotherapy, 2016,18(6):754-759.
[6] 白艳艳, 罗俊鹏, 郝福荣, 等. 超低温冻存前后胎儿脐血中NK细胞活性的研究[J]. 苏州医学院学报, 2000,20(4):331-332.
[7] Nham T, Poznanski S M, Fan I Y, et al. Ex Vivo-expanded Natural Killer Cells Derived From Long-term Cryopreserved Cord Blood are Cytotoxic Against Primary Breast Cancer Cells[J]. Journal of immunotherapy (1997), 2018,41(2):64-72.
[8] Shah N, Li L, McCarty J, et al. Phase I study of cord blood-derived natural killer cells combined with autologous stem cell transplantation in multiple myeloma[J]. Br J Haematol, 2017,177(3):457-466.
[9] Liu E, Tong Y, Dotti G, et al. Cord blood NK cells engineered to express IL-15 and a CD19-targeted CAR show long-term persistence and potent antitumor activity[J]. Leukemia, 2018,32(2):520-531.
