九华山位于安徽省池州境内，动植物资源丰富，黄精就是其中的一种。黄精为黄精属多年生草本植物，因外形与生姜相似，安徽九华山本地多称为老虎姜。黄精中含有多糖、皂苷、木脂素、蒽醌类化合物等成分，具有一定的增强免疫功能、延缓衰老、降血糖、抗炎等保健功效，其中最重要的成分就是黄精多糖。目前，针对黄精多糖的研究，有不同品种、地域、生长年龄黄精多糖含量的测定，药理和营养价值的探索以及多糖提取、纯化工艺的优化。多糖提取常用的方法有热水浸提法、醇析分离法、微波辅助提取、超声波辅助提取等。
1.1 材料与试剂
新鲜黄精，二年生，采自安徽省池州市九华山。葡萄糖、苯酚、浓硫酸、无水乙醇、乙醚、盐酸、氢氧化钠，均为分析纯。
1.2 仪器及设备
钢磨打粉机、热风干燥机、循环水式多用真空泵、离心机、恒温水浴锅、紫外分光光度计、电子分析天平、真空抽滤机、旋转蒸发仪、温度计、索氏提取器。
1.3 实验方法
1.3.1 葡萄糖标准曲线制备 多糖含量的测定参考标准《NYT 1676-2008食用菌中粗多糖含量的测定》[9]。精确称取105℃干燥至恒重的葡萄糖样品0.500 0g，于100mL容量瓶中定容至100mL。取出1mL定容于50mL容量瓶中，分别取0mL、0.2mL、0.4mL、0.6mL、0.8mL、1.0mL、1.2mL至具塞试管中，分别加蒸馏水至2mL、5%苯酚1mL、浓硫酸5mL，震荡，置于沸水浴中加热15min，取出后在流动自来水中迅速冷却。每样需平行3次。然后在紫外可见分光分光度计490nm处测吸光度值。以吸光度值为纵坐标（Y），以葡萄糖浓度（mg/mL）为横坐标（X），得到标准曲线得回归方程为y=58.829x+0.0099，相关系数为0.996 7（图1），表明测定吸光度与葡萄糖浓度呈现出良好的线性关系，可用于黄精多糖的测定。
1.3.2 操作流程
黄精干料→粉碎→脱脂→称取样品（1g）→加水恒温浸提→抽滤→取抽滤的液体→3倍乙醇沉淀过夜→旋转蒸发仪除去乙醇和水分→粗多糖定溶备用→苯酚-硫酸法测定吸光度值→计算多糖得率。
1.3.3 黄精多糖提取条件单因素试验
1.3.3.1 提取pH选择试验 准确称取黄精粉末1g，料液比为1∶25，提取时间2h，提取温度为80℃，考察提取pH为5、6、7、8、9条件下黄精多糖的提取率。
1.3.3.2 提取时间选择试验 准确称取黄精粉末1g，提取pH由1.3.3.1试验确定，料液比为1∶25，提取温度80℃，考察提取时间为1h、2h、3h、4h、5h条件下黄精多糖的提取率。
1.3.3.3 提取料液比选择试验 准确称取黄精粉末1g，提取pH由1.3.3.1试验确定，提取时间由1.3.3.2确定，提取温度80℃，考察料液比（g/mL）为1∶15、1∶20、1∶25、1∶30、1∶35条件下黄精多糖的提取率。
1.3.3.4 提取温度选择试验 准确称取黄精粉末1g，提取pH由1.3.3.1试验确定，提取时间由1.3.3.2确定，提取料液比由1.3.3.3确定，考察温度为60℃、70℃、80℃、90℃、100℃条件下黄精多糖的提取率。
1.3.4 正交试验法优化提取黄精多糖条件 在单因素试验的基础上，以提取时间、提取温度、提取的pH、料液比作为考查的4个因素，每因素取3个水平，以黄精多糖含量作为考察指标，进行L9（34）正交试验设计，得到最佳提取条件。
3 结论
本实验以来源丰富的安徽九华山二年生黄精为原料，利用浓硫酸-苯酚法测定多糖含量。在单因素的基础上，进行正交试验，确定以热水为溶剂提取黄精多糖的最佳工艺为：料液比1∶20（g/mL）、提取温度80℃、提取时间2h，提取pH7，在此条件下，黄精多糖的提取率为8.925%。从以上试验的分析结果可知，影响黄精多糖提取效果各因素的顺序为：料液比>提取温度>提取时间>提取pH，方差分析发现，料液比这一因素对多糖提取率的影响极为显著，其次是提取的温度。黄精中多糖含量丰富，具有多种生理活性功能，值得深入开发利用。
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