关于移液,许多实验汪已经自诩老司机了,可实战时的操作却总不如想象中那样完美。
有句俗话说得好:欲上精准路,须练基本功!
ep 学院期中考 “移液大作战” 试卷讲评现在开始,快跟紧小 E 老师的脚步重温一下那些年你一知半解的移液冷知识吧!

(之前成功参与活动的童鞋可以至文末查看获奖名单)
10 道考题,你都答对了吗?
第 1 题 · 师姐常说的 “反向移液” 到底是门什么功夫?
A 、反向移液是一种用来移取粘性、易挥发、高密度液体等的技术
B 、反向移液是一种以相反顺序移取样品以排除移液偏差的方法
C、 反向移液就是把刚打出去的液体又重新吸回来
小 E 老师:被反向两个字骗了?其实反向移液是指吸液时,将移液器的按钮直接按压到第二档再释放,这样会吸取比设定体积更多的液体;打出液体时只需按到第一档即可,此时吸头内会有少量液体剩余。
▲ 反向移液示意图
该方法可以对体积进行一定补偿,是移取问题液体的不二选择,如粘性液体(比如甘油)、易起泡液体(比如含去垢剂)、易挥发性液体(比如乙醇)。原来是这么回事,下次不能望文生义了。
正确答案:A
第 2 题 · 都是移液,让移液器侧着身子吸液时会有什么问题?
A、 这样操作将移取稍微多一点的液体
B、 这样操作将移取稍微少一点的液体
C 、没毛病,移液器的吸液角度不会对移取体积造成影响
小 E 老师:姿势就是力量!老师强调的端正姿势还是很重要的。当移液器以一定角度斜着吸液时,倾斜的状态会造成吸头内液体气压面的减小,从而造成吸取更多的液体。
正确答案:A
第 3 题 · 吸取易挥发性液体(比如丙酮)会对气体活塞式移液器产生什么影响?
A 、没有影响
B 、蒸气压将会使空气柱膨胀而导致液体滴漏
C、 蒸气压将导致吸头膨胀而使吸头脱落
小 E 老师:你以为易挥发性液体跟水性液体是闺蜜,就可以毫无阻碍地共享拍档吗?
NO,NO,NO!易挥发性液体挥发时,将导致气体活塞式移液器内的空气柱膨胀,导致吸头产生滴液。
▲ 易挥发性液体移液示意图
对于易挥发性液体,外置活塞式分液器是首选:液体与外置活塞直接接触,没有空气柱,不会造成液体滴漏。
如果手边只有气体活塞式移液器,那么移液前须至少预润湿吸头 5 次,并且配合使用反向移液技术,但液体仍可能会滴漏。移取问题液体造成的误差可谓防不胜防,经常和它们打交道的实验汪不如给自己配一支外置活塞式分液器,省心省力。
什么?你还不知道怎样区分气体活塞式和外置活塞式移液器?快点击微信菜单 [实验助手]-[移液百科] 一探究竟吧!
正确答案:B
第 4 题 · 移取血液时,首先要注意什么?
A 、当然要手握大蒜防止招来吸血鬼啦
B 、要使用外置活塞式分液器来移取准确的体积
C 、移液结束后,要仔细清洗吸头以便日后重新使用
小 E 老师:血液属于粘性液体。粘性液体具有很高的流动阻力,使用气体活塞式移液器时,会导致吸液放液速度慢,而且液体容易黏附在吸头壁上。当使用外置活塞式分液器时,液体与外置活塞直接接触,活塞沿着管壁将液体刮下而不会有残留,提高了移液精准度。
▲ 外置活塞式分液器操作示意图
此外,吸头属于一次性耗材,用完即丢弃,清洗后重复使用不仅会污染样品,移液精准度也大打折扣。
至于选项 A ……你说还有什么事儿比实验结果准确更重要?!
正确答案:B
第 5 题 · 每次移液,预润湿都好麻烦。这个步骤难道不能省省吗?
A、其实预润湿也没那么重要
B、这要分情况讨论,移取小于 10 微升体积的液体时就不能省
C、不能省
小 E 老师:人之初,性本懒,你的心情小 E 理解。但是,移取液体时,预润湿可使空气柱充满饱和的液体分子,进而提高移液体积准确度;若未进行预润湿,实际的移液体积将偏低于设定体积。
推荐至少预润湿 3 次,该方法特别推荐用于移取小于 10 微升的体积时。
▲ 未进行吸头预润湿操作可能导致移液结果误差
润湿不误移液工果然是真理!
正确答案:C
第 6 题 · 阅尽吸头无数的你,知道大多数吸头是什么材质的吗?
A 、PP(聚丙烯)
B 、PC(聚碳酸酯)
C 、PS(聚苯乙烯)
小 E 老师: PP(聚丙烯)材料热稳定性、机械稳定性、延展性及耐腐蚀性都很好。聚丙烯制成的吸头是其他材质无法企及的。下次挑选吸头的时候,别忘了看看它是块什么材料~
正确答案:A
第 7 题 · 校准移液器时,配合的吸头只要不会脱落就好了,为什么一定要选用同一厂家的?
A、 因为吸头应该是移液器长度的 1/5
B、 因为它们是由相同材料制成的,比如聚丙烯
C、 因为它们是原配,是一个体系
小 E 老师:移液器及吸头是一个完整体系,只有来自同一个厂家才能实现完美适配。如果使用来自不同厂家的吸头,移液器的精确度和准确度都会下降。校准操作将对移液系统在日常使用时的精准度造成影响,因此必须严格要求。
同样地,实际实验中,只有天生一对的默契拍档才能让移液器高水准发挥,随随便便的 “拉郎配” 也许会拖了它的后腿哦!
正确答案:C
第 8 题 · 滤芯吸头上滤芯是干嘛用的?
A 、滤芯能够阻止移液器内的部件掉入样品中
B、 滤芯能够保护移液器及样品免受气溶胶及生物分子的影响
C 、滤芯能够在吸头内形成层状空气流
小 E 老师:咱滤芯走的是 24 K 纯实力路线。通常移液过程中吸头内液体上方会形成气溶胶分子——它是由固体或液体微粒分散并悬浮在气体介质中形成的胶体分散体系。气溶胶会分散到移液器内部对其造成污染甚至损害,而受污染的移液器将对下一次移取的样品造成污染。
滤芯吸头内滤芯层采用柔性疏水材质,有效阻断了气溶胶及生物分子,特别适合于危险性样品的移取。
▲ 危险性样品移取操作示意图
正确答案:B
第 9 题 · 吸液时,吸头要浸入液面下多深为好呢?
A 、如果爱,请深爱,吸头应该直抵液体底部
B 、过犹不及,到达液体深度的中部就可以了
C 、不不不,相敬如宾才是,越浅越好
小 E 老师:距离产生美,吸头应该尽量浸没得浅一些,防止液体残留在吸头表面。但要注意,吸头也要浸没得足够深以防止吸取空气。
吸头与液体的关系,有时犹如人与人之间的亲密指数,交往深浅总是难以把握。好在小 E 这里有一份不同体积吸头的浸没深度指南,供各位参考:
▲ 吸头浸没深度指南
正确答案:C
第 10 题 · 如果移液时没有使用多道移液器的所有通道,会对移取液体体积造成影响吗?
A、 会有影响,每道移取的液体体积将会偏高
B、 没有影响,液体体积由活塞移动的距离决定,精准度不会受影响
C、会有影响,每道移取的液体体积将会偏低
小 E 老师:多道移液器每个通道都有独立的弹簧、活塞等部件,不会相互影响。看来,多道移液器的设计师早就考虑过这个问题了。
正确答案:B
好了,试卷讲评结束了,你的正确率如何呢?
以上问题告诉我们:
选择器材要挑剔点,移液操作要谨慎点;
小 E 的话,要多听点。
虽然这些冷知识点容易出错,还是有不少同学能够完美通关。
下面欢迎期中考试的优秀学员上台领奖!


再次祝贺你们,
你们将获得小 E 独家定制的圆珠笔一支。
赶快把你们的联系方式告诉小 E 吧!
☟☟☟
感谢各位科研人的参与!
持续关注小 E,前方还有更多精彩活动!
请长按以下二维码关注 Eppendorf 官方微信公众号,点击菜单 [ep 学院]-[课程中心] / [精华阅读] 进行回看。

点击文末阅读原文,巩固移液新知识吧!

