如何使用手动移液器进行小容量液体的移液？- 大数跨境

合众生物科技

2020-04-15

导读：当进行0.2 ~ 5 微毫克的液体移液时，移液的精准度非常重要，因为在处理小容量时，会很容易出现操作失误。因此，我们必须好的移液技术工具。

当进行0.2 ~ 5 微升的液体移液时，移液的精确性和准确度是非常重要，因为在处理小容量时，会很容易出现操作失误。因此，我们必须有好的移液工具和技术。

在准备PCR试验预混合液或酶反应时，我们越来越倾向使用小容量，因为有利于降低试剂用量和实验成本。但是进行小容量移液时，例如0.2 ~ 5 微升，是非常有挑战性的，需要更高的精确性和准确度。

以下是小体积精准移液必要条件：

1. 移液管和吸头的大小：始终选择尽可能小的公称容积和最小的吸头，以确保气垫也尽可能小。在移1微毫克的时候，选择0.25 ~ 2.5微升的移液器和与其匹配的吸头，而不是选择1-10微升的移液器。

2. 校准和保养：正确的校准和维护保养移液器是非常重要的。移液器校准得不准确和零部件的破损都会导致最后出来的数据值不准确。使用者应该每年按照ISO8655，对移液器进行必要的保养和维护。

3. 正排量式移液器：你实验室是否在使用正排量式低容量的移液器？通常使用该类型的移液器移液结果无论是在精准度和准确性上都比气垫式移液管好。

4. 尝试使用大容量：与直接移取小容量样品溶液的做法相比，将样品液稀释至更多的量，然后等量移取，这种这种做法更能减少移液结果的误差。

除了好的工具，研究人员还必须具有非常好的移液技术。请特别注意以下步骤：

吸头安装：请勿将吸头过于用力地卡到移液器上，因为这可能会损坏吸头的尖端，从而改变导管口的方向或损坏孔口。仅需在连接时施加轻微压力，并使用带有弹簧锥形吸头的移液器。
握住移液器：在等待离心机、循环仪等仪器出结果期间，请勿握住移液器。当手握住移液器时，移液器的内部会变热，导致气垫膨胀，这样移液时设定的容量就会不准确。
预润湿：湿润吸头和移液器内部有利于样品的吸取，能够避免吸取转移时溶液的蒸发。
垂直抽吸：这在处理小体积样品时非常重要，以避免吸管倾斜放置时发生的毛细管效应。
浸入深度：尽可能少地浸入吸头，以防止由于毛细管效应而使液体进入吸头。经验法则：吸头尖端和体积越小，浸入深度越低。小容量移液时，建议使用最大孔径为2mm的吸头。
以45°角分配液体：当移液器以45°角保持时，可以确保液体的最佳流出。
与容器壁或液体表面接触：只有在将尖端固定在容器壁上或浸入液体中时，才能正确地进行小容量分液。即使是从尖端流出的最后一滴水也可以准确分配。
吹出：吹出是小容量分液后必不可少的步骤，即时是吸头尖端里最后一滴液体。吹出应对着容器壁进行。在液体表面进行吹出时，请注意不要将气泡带入样品中。

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