【细胞小讲堂】C2C12（小鼠成肌细胞）的全面剖析,发现 C2C12 成肌细胞在肌肉生理学和疾病研究中的潜力。

细胞系的起源和一般特征是关于细胞系的主要信息，这些信息有助于决定在研究中使用它。在本文部分中，您将了解以下信息：C2C12细胞系的来源是什么？C2C12细胞的形态如何？C2C12细胞的大小是多少？

• C2C12是1977年由以色列魏茨曼科学研究所的Yaffe和Saxel开发的肌肉母细胞系的衍生物。最初的C2细胞系来自粉碎损伤2小时后的2个月大的正常C3H小鼠股骨肌。

• C2C12肌肉细胞在高血清条件下可以迅速增殖，并在饥饿状态（低血清条件）下分化成肌肉束。肌肉束是收缩型骨骼肌细胞的前身。

• 这些细胞具有类似肌母细胞的形态。它们表现出放射状分支，含有延伸在多个方向上的长纤维。

• C2C12肌母细胞是二倍体。

C2C12细胞是广泛培养的肌肉细胞。在开展C2C12细胞培养之前，您需要了解以下几个问题：C2C12细胞的倍增时间是多少？C2C12细胞的播种密度是多少？C2C12细胞培养基是什么？

培养A431细胞的关键要点

• 倍增时间：C2C12细胞的倍增时间在12~24小时之间。

• 生长特性：C2C12是一种贴壁型细胞系。

• 传代建议：C2C12播种密度保持在1 x 10⁴ cells/cm²。在这种播种密度下，细胞大约需要4天形成一层密集的单层。播种细胞时，使用磷酸盐缓冲溶液（PBS）冲洗细胞，并将其与传代溶液（Accutase）孵育。随后，离心收集脱落的细胞并重悬于生长培养基中。将重悬的细胞倒入新的培养瓶中进行培养。

• 培养基：RPMI 1640培养基中添加10%FBS、2.1 mMstable Glutamine和2.0 g/L NaHCO3用于培养C2C12细胞，每3至5天换液一次。

• 生长条件：C2C12细胞在配备5%CO2源的加湿培养箱中生长，温度为37°C。

• 储存：冻存的C2C12细胞需保持在-150°C以下的温度，可以是液氮或冰箱。

• 冻存建议：C2C12细胞的高度推荐的冷冻培养基是CM-1或CM-ACF。通过缓慢冷冻的方法来冷冻细胞，每分钟仅允许降低1°C的温度，以保持细胞活力。

• 复苏建议：冷冻的C2C12细胞在含有抗菌剂的37摄氏度水浴中解冻40至60秒。当只剩下少量冰块时，将细胞添加到培养基中并进行离心。收集到的细胞被重新悬浮并分装入培养瓶中进行生长。

• 生物安全等级：建议使用生物安全级别一来处理和维护C2C12培养物。

01.

优点

02.

缺点

4.1 肌肉生物学研究：

C2C12小鼠肌母细胞常被用作体外模型研究肌肉发育、代谢和分化。研究人员可以诱导C2C12细胞分化为肌肉样细胞，以探索参与肌小管形成、肌肉生成和肌肉再生有关的细胞和分子机制。

例如，一项研究表明，转化生长因子β1(TGF-β1)参与调控C2C12细胞增殖和分化。此外，发现还揭示了microRNA-22通过作用靶向TGFβR1来调节这些肌肉细胞功能 [3]。

4.2 药物筛选和毒性测试：

利用C2C12类肌肉细胞评估潜在的治疗剂（化合物或药物）用于对抗与肌肉相关的疾病。已进行了多项研究，利用C2C12细胞系评估药物对肌肉细胞代谢、增殖和分化的影响。2023年进行的一项研究调查并提出，Cnidoscolus aconitifolius（chaya）叶提取物可以在C2C12细胞中积极调节脂肪酸氧化和线粒体生物能量 [4]。类似地，一项研究表明，Moringa oleifera叶提取物可以保护C2C12肌小管免受过氧化氢诱导的氧化应激损伤 [5]。

白细胞介素-6通过JAK2-STAT3信号通路在小鼠C2C12肌母细胞系和人体原代肌母细胞中诱导肌源性分化该论文发表于2019年的《国际分子科学杂志》。研究提出了白细胞介素-6（IL-6）通过调控JAK2/STAT3信号通路诱导原代人体肌细胞和C2C12肌母细胞系的分化。

https://www.mdpi.com/1422-0067/20/21/5273

树莓叶提取物对HepG2、CRI-D2和C2C12细胞系葡萄糖代谢的影响这项研究发表于2023年的《糖尿病、代谢综合征和肥胖》杂志上。该研究探讨了树莓叶对C2C12和其他两种细胞系的葡萄糖代谢的影响。该提取物可能通过激活糖原生成来促进葡萄糖摄取和细胞糖原合成。

https://www.tandfonline.com/doi/full/10.2147/DMSO.S244850

小鼠C2C12肌母细胞分化显著降低了肌肉生长抑制素对细胞内信号传导的作用该研究提出，C2C12细胞分化显著抑制肌肉萎缩素（肌肉大小的重要负调节因子）对细胞内信号传导的作用。该论文发表于2020年的《生物分子》杂志上。

https://www.tandfonline.com/doi/full/10.2147/DMSO.S244850

染料木素对小鼠分化的C2C12肌母细胞系中与胰岛素通路相关的基因的影响：存在两种独立的作用方式的证据该研究发表于2018年的《Folia Histochemica et Cytobiologica》杂志上。该研究使用分化的小鼠肌母细胞系C2C12评估了染料木素对与胰岛素通路相关的基因的潜在影响。

https://journals.viamedica.pl/folia_histochemica_cytobiologica/article/view/56454

辣木叶提取物通过SIRT1-PPARα途径影响C2C12肌小管上的氧化代谢该研究发表于2021年的《植物医学增刊》杂志上。该研究提出，一种药用植物——辣木叶提取物通过调节SIRT1-PPARα途径促进线粒体生物合成和氧化能量代谢。

https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S2667031320300142

以下是一些关于C2C12细胞的在线资源：

C2C12转染方案：此视频是C2C12细胞系体外转染的详细教程。

https://www.bilibili.com/video/BV1MM4y1x71k/?vd_source=9da05a78ddad502811a4670556611424

以下是C2C12细胞的细胞培养方案：C2C12肌母细胞：本文档提供了C2C12肌肉细胞的细胞传代和转染的操作步骤。

https://bio-protocol.org/pdf/bio-protocol172.pdf C2C12培养：此链接包含有关培养和冻存C2C12细胞的有用信息。

https://www.taizecell.cn/goodsDetail?skuId=1632277457791291393&goodsId=1632277457766125569

1. Denes, L.T., et al., Culturing C2C12 myotubes on micromolded gelatin hydrogels accelerates myotube maturation. Skeletal muscle, 2019. 9(1): p. 1-10.

2. Wong, C.Y., H. Al-Salami, and C.R. Dass, C2C12 cell model: its role in understanding of insulin resistance at the molecular level and pharmaceutical development at the preclinical stage. J Pharm Pharmacol, 2020. 72(12): p. 1667-1693.

3. Wang, H., et al., miR-22 regulates C2C12 myoblast proliferation and differentiation by targeting TGFBR1. European Journal of Cell Biology, 2018. 97(4): p. 257-268.

4. Avila-Nava, A., et al., Chaya (Cnidoscolus aconitifolius (Mill.) IM Johnst) leaf extracts regulate mitochondrial bioenergetics and fatty acid oxidation in C2C12 myotubes and primary hepatocytes. Journal of Ethnopharmacology, 2023. 312: p. 116522.

5. Ceci, R., et al., Moringa oleifera leaf extract protects C2C12 myotubes against H2O2-induced oxidative stress. Antioxidants, 2022. 11(8): p. 1435.