研究表明PEDV灭活苗不能缩短PEDV排毒时间

2013年美国暴发了严重的以腹泻和呕吐为主要症状的PEDV疫情，死亡率接近100%。种猪场通过在生物安全允许下有意使猪群接触病毒，使猪场恢复了正常，并产生了免疫力。对于曾经感染过PEDV的猪场，一些养殖者选择在后备母猪被引入母猪群之前进行驯化。如果后备母猪在驯化后太早进入猪群，则后备母猪易成为传染源使猪场母猪和仔猪再次感PEDV。驯化后备母猪并使其在排毒期之后引入母猪群是防控母猪群感染PEDV的的一种成功策略。研究表明感染PEDV后，粪便和口腔液排毒维持时间为69天（Bjustrom-­Kraf J 等，2016）。因此，后备母猪在驯化后至少需要隔离饲养10周方可引入母猪群。由于返饲成本高时间长，为了了解使用疫苗后是否会对PEDV排毒时间产生影响，研究人员设计了以下试验以作评估。

试验所用母猪为PEDV阴性后备母猪，共60头。试验共分为四组：对照组（CONTROL），未免疫苗组（NV），攻毒前免疫组（PRE）和攻毒后免疫组（POST）。对照组试验猪为20头，每头实验猪口服PEDV进行攻毒，每7天采集粪便样品进行为期9周的RT-PCR检测。9周后，对照组中的18头实验猪转入未免疫苗组。攻毒前免疫组和攻毒后免疫组各有20头实验猪。攻毒前免疫组分别在PEDV攻毒（肌肉注射）前5周和2周接种PEDV灭活疫苗。攻毒后免疫组分别在PEDV攻毒（肌肉注射）后1周和3周接种PEDV灭活疫苗。攻毒后，每7天采集粪便样本做RT-PCR检测。连续3次RT-PCR检测阴性则不再收集粪便样本。每组实验组在攻毒前都要采集血液样品进行ELISA检测。

血清学结果显示，对照组和攻毒后免疫组PEDV抗体阴性。未免疫苗组和攻毒前免疫组PEDV抗体呈阳性。攻毒6周后，大部分对照组粪便中检测不到病毒。第7周和第8周粪便检测阴性。第9周，有一头实验猪前2周检测为阴性，随后检测为阳性。所有的未免疫苗组实验猪在攻毒后第四周开始不再排毒。攻毒后免疫组和攻毒前免疫组排毒都超过了6周，攻毒后免疫组在第7周停止排毒，攻毒前免疫组在第8周停止排毒。统计学分析未免疫苗组与对照组相比有统计学意义，差异显著(P <0 .01)。免疫灭活苗组与对照组相比无统计学意义，差异不显著。

血清学分析显示，对照组和攻毒后免疫组未检测到抗体，未免疫组和攻毒前免疫组抗体阳性。对照组未检测到抗体是因为实验猪为PEDV抗体阴性猪。同样地，攻毒后免疫组也是PEDV阴性且攻毒前未免疫疫苗故抗体阴性。未免疫苗组抗体阳性，因为之前已经对实验猪进行了攻毒，故机体有抗体。攻毒前免疫组阳性是因为在攻毒前免疫了疫苗故此产生了抗体。先前的研究表明（Gillespie T 等，2017），对未接触过PEDV的母猪接种灭活苗会引起免疫反应，但在乳汁中没有产生中和抗体反应，在初乳中只有微弱的抗体反应。Greiner L 等研究表明PEDV疫苗有效的提高了猪体抗体水平，但灭活苗未表现出对PEDV阴性猪的临床免疫保护反应。

在这项研究中，无论在攻毒前还是攻毒后进行灭活苗的免疫都没有观察到对PEDV排毒持续时间的明显影响。之前感染过PEDV在第二次接触病毒后可缩短粪便中PEDV排毒的持续时间。然而，之前感染过病毒在再次感染病毒时并不能完全阻止粪便排毒。这可能是由于初次感染PEDV后，对同源病毒产生的保护作用。Gerber等人研究发现用同源的PEDV再次感染实验猪没有出现任何临床症状或病变，只有不到10%的实验猪出现排毒现象。这这项研究中，未免疫苗组出现了温和的临床症状，有38.9%的猪出现了排毒的现象。这项研究观察到攻毒后粪便排毒的持续时间超过9周。Bjustrom-­Kraf J等人的研究表明攻毒后病毒排毒的持续时间为10周。从试验结果看，无论是在攻毒前或攻毒后，后备母猪进行灭活苗的免疫不能缩短病毒在粪便中排毒的时间。因此，病毒的排毒不受灭活苗的影响。之前感染过有致病性的PEDV，在再次感染PEDV后对病毒的排毒时间有显著影响。

灭活苗对PEDV阴性猪无临床免疫保护。对PEDV阴性猪尤其是后备母猪应先用活苗（弱毒苗）免疫，使母猪接触病毒后触发肠黏膜免疫以产生临床有效的乳汁免疫。且利用活苗免疫可有效控制病毒排毒，减少病毒载量，缩短排毒时间。对长期未免疫PEDV疫苗且未发生疫情的猪场以及进行季节性免疫的猪场，在针对PEDV免疫防控时，建议先使用活苗进行免疫，随后跟胎免疫以更加有效的保护初生仔猪免受PEDV侵扰。