
LUC植物叶片成像利用荧光素酶(luciferase,LUC)作为报告基因对活体状态下的植物叶片进行分子水平的定性和定量研究,通常可以用于蛋白质-蛋白质相互作用、基因表达调控、植物转基因启动子活性监测、植物免疫机制等方面的研究。LUC实验因其高灵敏度、可定量化、操作简单高效而在植物学研究中得到了广泛应用。通过这种实验技术,研究人员能够更深入地理解植物内部复杂的分子机制。
因LUC实验需要较高的检测灵敏度,那么如果我们想进行LUC植物叶片成像是否需要一台活体成像设备才能完成?其实不然,如果你的实验室有一台Bio-Rad的ChemiDoc系列的化学发光成像系统,你也可以轻松完成LUC植物叶片成像实验。ChemiDoc系统的冷CCD/CMOS检测器可以足够灵敏的检测到植物叶片的LUC底物发光信号。实验效果我们可以先参考一篇四川农业大学水稻研究所李伟滔教授课题组发表在《Nature Communications》上的LUC叶片成像结果(参考文献1)。


左图:ChemiDoc成像系统拍摄的LUC成像图片;
右图:本氏烟叶叶片明场图像(图片来源:参考文献1)
从LUC成像实验结果可以明显看出:与空载对照相比,CsSPAB1ΔSP能够显著激活SbBsr-d1启动子,从而导致LUC表达水平显著提高。这是一个CsSPAB1ΔSP(ΔSP表示信号肽被删除的CsSPAB1)与SbBsr-d1启动子相互作用实验,SbBsr-d1是高粱(Sorghum bicolor)中Bsr-d1基因的同源基因。实验中,SbBsr-d1启动子与LUC报告基因融合,形成报告构建物(SbBsr-d1:LUC)。当这个报告构建物与CsSPAB1ΔSP共转化到烟草叶片中时,CsSPAB1ΔSP能够显著激活SbBsr-d1启动子,导致LUC表达水平显著提高。
类似的实验体系也用于研究YFP/EAT1与OsLTPL94启动子的相互作用研究中(参考文献2)。

LUC成像发光图及叶片明场图片的合成图
实验中,将效应子和报告子通过农杆菌介导的浸润共转化到烟草叶表皮细胞中,或通过聚乙二醇介导的转化共转化到水稻原生质体中,将稀释的 d-荧光素钾盐 (1 mM) 涂抹在烟叶表面,使用ChemiDoc成像系统进行发光及明场图片的拍摄。
如果您也希望进行LUC植物叶片的成像实验,您也许需要的只是一台ChemiDoc成像系统。Bio-Rad ChemiDoc成像系统有ChemiDoc、ChemiDoc Go及ChemiDoc MP三款选择,都可帮助您完成LUC成像实验及普通的ECL成像、凝胶成像实验。此外,ChemiDoc Go还具备2通道荧光成像;ChemiDoc MP具有5通道荧光成像功能。如您需要了解更多ChemiDoc系统或获取报价,请扫描二维码,填写表单,我们的客户代表将与您尽快取得联系。

参
考
文
献
* BIO-RAD 是 BIO-RAD LABORATORIES, INC. 在特定区域的商标。
* 本产品仅用于科研用途,不用于临床诊断。

