qPCR通过荧光染料或荧光特异性探针,对PCR产物进行标记跟踪,实时监测反应过程。每扩增一条DNA链,就有荧光染料分子结合到双链DNA上或有荧光分子从探针上释放,实现荧光信号的积累。荧光积累与PCR产物形成完全同步,可通过软件对荧光积累信息进行分析和计算,获得待测样品模板的初始浓度。但是,qPCR只能通过标准曲线进行相对定量,无法做到精准的绝对定量。
NGS可以一次对几十万到几百万条DNA分子进行序列测定。在基因组水平上,NGS可进行公投测序而获得该物种的全长序列,为后续研究奠定基础;对已知参考序列的物种,进行全基因组重测序可检测新的突变位点,发现个体差异的分子基础。在转录组水平上,NGS可进行全转录组测序,开展可变剪接、基因表达差异、新非编码RNA分子发现等研究。NGS与染色质免疫共沉淀和甲基化DNA免疫共沉淀技术相结合,可检测出与特定转录因子结合的DNA区域和基因组上的甲基化位点。NGS功能强大,但是实验操作比较复杂,数据分析难度大,检测周期长,成本较高。
数字PCR是新兴起来的一种核酸分子绝对定量技术。该技术可直接获得DNA分子的拷贝数,实现起始样品中核酸分析的绝对定量,且无需标准品或内标。数字PCR已经被广泛应用到医学、生物学等各个领域,如拷贝数变异、突变检测、复杂来源样品中低丰度核酸分子检测、NGS数据验证、miRNA等微小差异表达研究、单细胞基因表达分析等方面,在已知突变的癌症分子标志物的检测、传染病病原体检测、基因组三倍体分析和基因表达分析等领域展现了强大的优势。
问题来了:选择哪种检测技术才能更好的达到预期效果?看完下面的比较,您就会找到答案。
从上表来看,数字PCR因为灵敏度高、绝对定量、操作简单等优点,在肿瘤液态活检、无创产前筛查、感染性疾病早期诊断等方面具有显著优势。
那么,数字PCR怎么选?当然是选择Bio-Rad QX200微滴式数字PCR系统啦!
目前QX200在全球的装机量>2000台,国内装机量>400台;文献数量>2700篇,so,有这么庞大的客户群和文献支持,您还犹豫什么?
有图有真相!广东省部分客户名单都整理好了!
科研高校用户:
广西医科大肿瘤实验室
医院用户:
工业用户:
最后,推荐给实用小工具,近3000篇基于Bi0-Rad ddPCR平台发表的应用文献,扫码即可检索。

