有没有一款无需蛋白酶K灭活、无需过夜消化、无需抽提与纯化的鼠尾鉴定试剂盒？当然有，源井“明星”试剂盒——鼠尾鉴定试剂盒，该试剂盒15min完成裂解，实现一步法PCR鉴定，超省时、省力、省成本！今天，小源给大家带来鼠尾鉴定试剂盒的操作视频，超容易上手！
鼠尾鉴定—视频
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鼠尾鉴定—文字版
一
对于样品数量较少，可以采用散管操作的方式进行：
①首先，将剪取好的1-2mm鼠尾样品，用镊子夹到1.5ml的EP管中，加入50-100ul Tail Lysis，注意液面需要没过鼠尾样品；
②将步骤①中含有样品及Tail Lysis的EP管放到恒温金属浴中，设置95℃，进行孵育15-30min；（如果样品若为脚趾，孵育时间建议延长到30min，裂解效果会更好)；
③孵育结束后，用单道移液器小心地将上清液转移至8联管或EP管中存放（注意尽量不要吸取到残余的鼠尾及组织）；
④此时的上清液，可直接进行后续的PCR实验；若暂时不使用，请保存于-20℃冰箱中，且避免反复冻融；
⑤将Direct PCR Taq Mix（+Dye）和TailAmp ctrl，提前置于冰上进行溶解，并按照说明书中推荐的PCR体系，进行配制：
若为鉴定样品，则使用对应的鉴定引物，鉴定引物F与R各加入1ul，若需验证鼠尾DNA的质量情况，则使用TailAmp ctrl并加入2ul；
鼠尾裂解产物加入1ul，ddH2O加入9.5ul，Direct PCR Taq Mix（+Dye）加入12.5ul；
⑥将8联管放入PCR仪中，设置程序后，进行扩增反应。将扩增好的样品取5ul 进行琼脂糖凝胶电泳，观察扩增条带。
二
对于样品数量较多，可以采用96孔板高通量操作：
①首先，将剪取好的1-2mm鼠尾，用镊子分别夹到96孔PCR板中，加入50-100ul Tail Lysis,
这个时候，要注意液面需要没过鼠尾样品；
②将含有样品及Tail Lysis的96孔PCR板放到PCR仪中，设置95℃，孵育15-30min；（如果样品若为脚趾，孵育时间建议延长到30min，裂解效果会更好)；
③孵育结束后，用多道移液器小心地将上清液转移至96孔PCR板中存放（注意尽量不要吸取到残余的鼠尾及组织），并且注意不要错孔；
④此时的上清液，可直接进行后续的PCR实验；若暂时不使用，请保存于-20℃冰箱中，且避免反复冻融；
⑤按照说明书中推荐的PCR体系，根据样品数量进行混合体系的配制（以96个样品为例）:鉴定引物F与R各加入100ul，ddH2O加入950ul，Direct PCR Taq Mix（+Dye）加入1.25ml；
⑥体系配制完成后，用移液器充分混匀，取24ul分装于干净的PCR板中，再加入1ul鼠尾裂解上清液样品，盖好硅胶模，放置于离心机上进行瞬时离心，放入PCR仪，设置程序后，进行扩增反应。将扩增好的样品取5ul 进行琼脂糖凝胶电泳，观察扩增条带。
电泳条带常见问题
A
若实验组及对照组均有理论条带：
则裂解操作与PCR扩增无问题。
B
若实验组无理论条带，对照组有理论条带：
裂解操作无问题，可能需根据引物退火温度及扩增序列的特性进行PCR程序的调整；
C
若实验组及对照组均无条带：
裂解操作或PCR扩增可能存在问题。可重新用TailAmp ctrl对2~3个样品进行PCR扩增，如重新PCR有理论条带，排除掉裂解操作问题，实验组样品可能需根据引物退火温度及扩增序列的特性进行PCR程序的调整；如重新PCR无理论条带，裂解操作出现问题，建议重新制备。
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