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实验用水怎么选?去离子水、双蒸水、超纯水傻傻分不清楚?

实验用水怎么选?去离子水、双蒸水、超纯水傻傻分不清楚? 捷倍斯生物
2023-07-06
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导读:水是人体细胞的主要成分之一,占体重的60%~70%. 人体各种生命活动离不开水,随着科技的发展越来越多的应用开始要求使用纯度高的超纯水,尤其是在各种科学实验和精密仪器中更不可缺少。

水是人体细胞的主要成分之一,占体重的60%~70%,人体各种生命活动离不开水,随着科技的发展进步越来越多的领域开始要求使用超纯水 尤其是在各种科学实验和精密仪器中。

图自:昵图网nitu.com
一. 什么是超纯水?

超纯水(Ultrapure water)又称UP水,是指电阻率达到18 MΩ*cm(25℃)的水。这种水中除了水分子外,几乎没有什么杂质,更没有细菌、病毒、含氯二噁英等有机物,当然也没有人体所需的矿物质微量元素,也就是几乎去除氧和氢以外所有原子的水。

那么普通的水中又存在哪些杂质呢?

1. 微生物:细菌类、藻类
2. 微粒子:铁锈、胶体、悬浮物、固体颗粒
3. 可溶性无机物:无机盐类、溶解气体、重金属、硬度成分(钙、镁等)

4. 可溶性有机物:木质素、单宁、腐植酸、内毒素、RNA分解酶、农药、三氯甲烷、环境荷尔蒙物质、界面活性剂、有机溶剂

二.  评价水质的指标有哪些

1电阻率(electrical resistivity),超纯水电阻率的单位为MΩ/cm(25℃),是衡量实验室用水导电性能的指标。超纯水的电阻率随着水内无机离子的减少而电阻加大,电阻率与电导率成倒数关系。实验室超纯水的标准:水的电阻率为18.25MΩ.cm(25℃)。

2、TOC总有机碳(Total  Organic  Carbon),TOC是超纯水中碳的的浓度,单位为ppm或ppb,能够反映水中氧化的有机化合物的含量,对一些有机物实验影响较大。


3、内毒素(Endotoxin),内毒素又称之为“热原”,主要是革兰氏阴性细菌的脂多糖细胞壁碎片,其单位cfu/eu,去除内毒素的超纯水主要应用在生命科学方面。
三. 纯水分为几个等级?
1. 纯水:纯化水平最低,通常电导率在1-50μs/cm之间。它可经由单一弱碱性阴离子交换树脂、反渗透或单次蒸馏制成。典型的应用包括玻璃器皿的清洗高压灭菌器、恒温恒湿实验箱和清洗机用水。

2. 去离子水:电导率通常在1.0-0.1μs/cm之间。通过采用含强阴离子交换树脂的混床离子交换制成,但它有相对较高的有机物和细菌污染水平,能满足多种需求,如清洗、制备分析标准样、制备试剂和稀释样品等。

3. 实验室Ⅱ级纯水:电导率<1.0μs/cm,总有机碳(TOC)含量小于50ppb以及细菌含量低于1CFU/ml。其水质可适用于多种需求,从试剂制备和溶液稀释,到为细胞培养配备营养液和微生物研究。这种纯水可双蒸而成,或整合RO和离子交换/EDI多种技术制成,也可以再结合吸附介质和UV灯。

4. 超纯水:这种级别的纯水在电阻率、有机物含量、颗粒和细菌含量方面接近理论上的纯度极限,通过离子交换、RO膜或蒸馏手段预纯化,再经过核子级离子交换精纯化得到超纯水。通常超纯水的电阻率可达18.2MΩ-cm,TOC<10ppb,滤除0.1μm甚至更小的颗粒,细菌含量低于1CFU/ml。超纯水适合多种精密分析实验的需求如高效液相色谱(HPLC),离子色谱(IC)和离子捕获-质谱(ICP-MS)。少热源超纯水适用于像真核细胞培养等生物应用,超滤技术通常用于去除大分子生物活性物质,如热源(结果为<0.005IU/ml)以及无法检测到的核酸酶和蛋白酶。

四. 纯水应用在哪些领域?

1. 生命科学应用
主要有:细菌细胞培养,临床生物化学,电泳,电生理学,酶联免疫吸附分析,内毒素分析,组织学,水栽培,细胞免疫化学,哺乳动物细胞培养,介质制备,微生物分析,分子生物学,单克隆抗体研究,植物组织培养,放射性免疫分析等等。
2. 分析和常规应用
主要有:蒸馏水器供水,蒸汽发生器,玻璃器皿清洗,样本稀释和试剂制备,超纯水系统供水,固相萃取,普通化学,电化学,分光光度计,TOC分析,水质分析,离子色谱,火焰法原子吸收(Flame-AAS),石墨炉原子吸收(GF-AAS),高效液相色谱(HPLC),液质联用(HPLC-MS),电耦合等离子光谱仪(ICP-AES),等离子质谱(ICP-MS),痕量金属检测,气质联用(GC-MS)等等.
五. 哪些应用对水质的要求高?

1. 生物电泳:电泳用水最重要的要求是生物活性物质诸如内毒素(通常小于0.05EU/ml),核糖核酸酶和蛋白酶(不可测定)的去除。最好用电阻率18.2MΩ-cm,TOC<10ppb,0.1μm或更小孔径的微滤以及细菌含量低于1CFU/ml的超纯水作为供水。

2. 内毒素分析:从分离到细胞培养的各种应用领域用水都要求规定内毒素指标,内毒素最大指标范围从0.25IU/ml到0.03IU/ml。对内毒素分析,适用少内毒素的超纯水,通常是0.05IU/ml或更小。超滤是制造少内毒素超纯水的必须手段(国际上通常使用MWCO为5000道尔顿的超滤膜),而且可以结合UV等进行光氧化。
3. 质谱分析:质谱能对混合物进行痕量分析,由于其高灵敏度,要求最高纯度的用水。所有的样本制备和前处理,例如固相萃取都需要超纯水。要求水中杂质在ppt水平,进行有机物分析时要求电阻率18.2MΩ-cm,非常低的TOC,一般指标小于3ppb。
4. 石磨炉原子吸收光谱:GF-AAS与其他原子吸收光谱测定的不同之处是,其火焰炉被电子发热石墨管或棒替代,能在元素分析中达到很高的灵敏度。GF-AAS要求顶级纯水系统,提供ppt级的杂质水平,18.2MΩ-cm的电阻率和低TOC水平。内置监测仪提供纯度保证,最终的水质指标是由良好的预处理系统,加上连续循环流路和纯水的超纯化而实现。
5. 电感耦合等离子光谱仪:在ICP-AES应用中,对不同元素的灵敏度明显不同,但金属、过渡金属、磷和硫检测下限都在ppb范围内。ICP-AES对水的纯度要求相当严格,电阻率大于18MΩ-cm的超纯水是必须的,TOC的要求一般不太重要,前处理要求反渗透或离子交换。
6. 电感耦合等离子光谱质谱联用:ICP-MS可被用于测定在ppt水平的元素。对这种灵敏的ICP-MS分析工作,水的纯度要求非常严格,要求水中杂质在ppt水平,电阻率18.2MΩ-cm和较低的TOC。最终的水质指标是由良好的预处理系统,加上连续循环流路和纯水的超纯化而实现。
7. 痕量金属检测:先进的现代分析仪器不断提升分析的灵敏度。痕量元素现在通过使用诸如ICP-MS技术,可测定在ppt和亚ppt水平的物质。痕量分析工作需要不含可测定成分的纯水,并且水质要求适用于最严格最灵敏的ICP-MS工作。因此,空白试剂,标准样稀释和样本制备均需要纯度最高的超纯水,甚至需要在无尘室中操作。
六. 水的纯化技术有哪些?
蒸馏,活性碳吸附,微滤,超滤,反渗透(RO),反渗透(RO),紫外灯,KDF法等。

七. 怎么让超纯水保持最佳水质?

超纯水取水后很容易遭到环境污染,所以使用前取水(即取即用)方式时最合适的。只有把超纯水与环境接触的时间缩到极短,才能够获得纯度极高的超纯水。
1.在配置高纯度的化学试剂时,尽量不要使用长时间储桶中存放的超纯水,因为储桶经长时间使用后,会因杂质、微生物的污染而造成水质的劣化,像这种水,在使用时已经不再是超纯水。
2.纯水储桶最好安装空气过滤器,防止环境因素造成的污染。储水桶请勿放置在日光直射处,水温上升,容易造成微生物繁殖。特别是半透明储水桶,也会因为日光通透而造成藻类繁殖。
3.超纯水取水时一定要将初期的出水放掉,以获得稳定的水质。取水时让超纯水顺着容器侧壁流入,尽量不要让气泡产生,可降低空气污染。
4. 请不要在终端滤器后再连接软管,使用直接取水的方式才能获得纯度高的超纯水。长时间不用纯水时,应将压力储水桶中的RO水全部放掉以防止污染。
5. 超纯水机若长时间不使用,再次使用时应把初期纯水充分放掉以确保水质。原则上,纯水机应至少每7—10天通水一次,以防止微生物污染。捷倍斯品牌的超纯水机有自动开启内部水循环的功能,在假期或者长期不放水的情况下仍然可以保持稳定良好的水质。

参考文献:

1.科研星球《实验室用水知识大全

2.百度百科《超纯水》

3.捷倍斯生物官网

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