Tris 是这三种种缓冲液的基础成分之一,为缓冲体系提供稳定的 pH 环境。Mg2+是DNA酶的激活剂,EDTA是一种螯合剂,能与Mg2+等二价金属离子结合,可防止电泳时被DNA酶降解。
1、TE、TAE、TBE成分
TE缓冲液成分: 1×TE缓冲液:10 mmol/L Tris.Cl;1mmol/L EDTA,pH 8.0
TAE缓冲液成分:1×TAE缓冲液:40 mmol/L Tris-乙酸;2mmol/L EDTA,pH 8.0
TBE缓冲液成分:1×TBE缓冲液:45 mmol/L Tris-硼酸;1mmol/L EDTA,pH 8.0
2、TE、TAE、TBE的用途
TE缓冲液:一般用作溶解剂或保持剂,常用于溶解DNA,能稳定储存DNA。
TAE缓冲液:生物学中使用最广泛的核酸电泳缓冲液,主要用于DNA的琼脂糖凝胶电泳。
TBE缓冲液:生物学中常用的核酸电泳缓冲液,主要用于DNA的琼脂糖凝胶电泳。
TAE和TBE缓冲液的选择:
TAE和TBE缓冲液都可以用于DNA的琼脂糖凝胶电泳,两者各有利弊,应根据实际情况选择不同的缓冲液。
3、TAE和TBE缓冲液的区别
TAE缓冲液的优点:超螺旋在其中电泳时更符合实际相对分子 缓冲容量小,长时间电泳(如过夜)不可选用。质量电泳大于 13kb 的片段时分离效果好,可用于回收 DNA 片段,常用于研究盐对DNA电泳速度的影响。
缺点:缓冲容量小,长时间电泳(如过夜)不可选用。
TBE缓冲液的优点:常用于DNA的琼脂糖凝胶电泳,尤其适合对小分子DNA以及RNA的电泳。TBE中的EDTA可螯合二价阳离子,抑制DNA酶活性,防止PCR扩增产物降解。
缺点:缓冲液中的硼酸成分会影响 DNA 回收效率以及后续的酶反应实验,不宜在回收电泳中使用。
| 货号 | 产品名称 |
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50xTAE(Tris-Acetate-EDTA Buffer)Tris-乙酸-EDTA缓冲液 |
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5xTBE (Tris-Borate-EDTA Buffer) Tris-硼酸-EDTA 缓冲液 |
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TE(Tris-EDTA Buffer)Tris-EDTA 缓冲液 |
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4、价格
TAE:价格相对较便宜。TBE:通常比TAE花费稍贵。
5、储存及安全性
虽然TAE和TBE在正常使用下都是安全的,但TBE中的硼酸被认为具有潜在的毒性,因此在处理和使用时需更加小心。
TAE:溶解度大,易于储存,一般不存在沉淀问题。
TBE:溶解度小,不易长期储存,容易产生沉淀,在配制和使用时需注意观察溶液状态,出现沉淀后应予以废弃。
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