经过TTC染色后的脑组织
图源：英瀚斯生物
二.TTC染色原理
TTC（2,3,5—氯化三苯基四氮唑）是脂溶性光敏感复合物,1894年首次合成用来检测种子的生存能力,1958年开始用来染色检测哺乳动物组织的缺血梗塞。它是呼吸链中吡啶—核苷结构酶系统的质子受体,与正常组织中的脱氢酶反应而呈红色,而缺血组织内脱氢酶活性下降,不能反应,故不会产生变化呈苍白。
TTC可以被活细胞中的具有还原活性的酶(好像主要是琥珀酸脱氢酶)还原生成粉红色的还原产物，所以活组织部分呈现粉红色，而死亡的细胞的还原酶的活力已经消失，因此TTC不能被还原，所以死亡的组织呈现白色。
对于种子或者植物组织来说，染色结果为活组织被染成不同程度的红色，死组织或者无生命力的组织不着色。对于缺血梗塞组织，因组织坏死脱氢酶活力丧失呈现苍白色，而正常组织呈深红色。TTC常用的染色浓度为2%（w/v），也可根据组织类型做浓度的适当调整。
三.TTC染色步骤
取脑：可麻醉后直接取脑或经生理盐水灌注后取脑。因为脑组织未用多聚甲醛固定，所以较软，取脑时更应仔细，保持大脑的完整性。
－20度冰箱中速冻20分钟左右，便于切片。
切片：一般切成5－6片，每隔2mm切一片。第一刀在脑前极与视交叉连线中点处；第二刀在视交叉部位；第三刀在漏斗柄部位；第四刀在漏斗柄与后叶尾极之间。如果需计算面积的话，应切得均匀或用专门的脑槽。
将切片置于TTC中，常规浓度为2%，也有用1%或更低浓度的。
用锡箔纸盖住后，放入37C温箱15～30min，不时翻动脑片，使均匀接触到染色液。
染色后效果：为皮层下梗死。
捷倍斯生物公司生产的2%TTC染色液 TTC Solution(GBCBIO-G8075)常用于实验中检测种子的生存能力以及检测哺乳动物组织的缺血梗塞。它是呼吸链中吡啶—核苷结构酶系统的质子受体，能与正常组织中的脱氢酶反应而呈红色。
https://www.gbcbio.cn/Product/0765.html
TTC染液是一种脂溶性光敏感复合物，用TTC染色即可用来检测种子的生存能力，也可用来检测哺乳动物组织的缺血梗塞。检测机制在于TTC本身可作为一种氧化还原指示剂，活细胞内的脱氢酶（尤其是线粒体内的琥珀酸脱氢酶）可以将TTC还原为红色甲臢化合物TPF（1,3,5-triphenylformazan）。
四.TTC染色有什么优点？
方法简便易行。取材于新鲜组织, 方便易行；而常规 HE 染色则需要固定及包埋标本, 并且经切片后才能染色。
节省时间。TTC 染色的全过程约 15～30min，远远优于 HE 染色。
所需仪器设备简单。与 HE 染色所需的切片机、包埋盒等相比，TTC 染色几乎不需要特殊的实验器材。
TTC染色液可重复使用。在 3 天时间内，10 ml 的 TTC 染液可重复使用 2～3 次，大约能染 18 张切片。
五.TTC染色有哪些注意事项？
TTC溶液若变成红色则不可再用。
显色时要使组织切片全部浸入TTC染色液中。
TCC染色后应立即观察，不可久放。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
品牌优势
捷倍斯生物可以提供专业和完善的核酸分离纯化解决方案，有硅胶柱法、磁珠法与溶液直接法的核酸纯化产品，在二代测序的样品前处理方面有着专业的技术与积累，有完善的针对唾液、血液与血浆等样品的保存、运输与高通量核酸纯化等整套的解决方案。 在诊断试剂原料方面，捷倍斯生物可以提供生物染色剂、高端的表面活性剂、显色底物、生物缓冲剂以及酶制剂与其稳定剂等系列产品。
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