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该选β-Actin、Tubulin，
还是GAPDH，抑或是热休克蛋白？
你还再为斑马鱼合适内参的选择而头秃吗？
权威的斑马鱼WB内参选择Protocol来了，
做斑马鱼模型的你快快下载参考吧！
对于斑马鱼研究人员来讲，经常面临比较的挑战是处于不同发育阶段或来自不同品系的胚胎。在这些条件下，传统的管家蛋白（Actin、Tubulin、GAPDH）的量可能会发生变化，从而增加不必要的定量误差。在《Methods in Molecular Biology》期刊上，匹兹堡大学的研究人员介绍了一种新的Stain-Free总蛋白内参方法，用以替代传统看家蛋白作为内参，很好的避免了斑马鱼在发育过程中看家蛋白变化所导致的定量偏差（Stain-Free Approach for Western Blot Analysis of Zebrafish Embryos）。
研究人员非常推荐使用Bio-Rad Stain-Free技术获得的总蛋白作为斑马鱼研究中WB实验的内参。以斑马鱼受精后的胚胎作为样品，展示了她们所建立的标准操作流程，以及WB的实验定量结果
Stain-Free总蛋白及WB数据（受精后2天）
Stain-Free总蛋白及WB数据（受精后5天）
Stain-Free总蛋白归一化后的定量数据
Stain-Free技术使用独特的三卤化合物使蛋白质具备直接在凝胶中发荧光的功能，且仅需1min的紫外光激活步骤。能够实现总蛋白归一法，总蛋白归一法相比于传统内参更适合让您的实验结果更加精准。
完整的斑马鱼受精卵Stain-Free总蛋白内参定量操作标准流程请参考文末文献。要获得更详细的Stain-Free技术信息或实验方案，我们当地的技术支持或合作伙伴会非常乐意与您联系。请扫描二维码并留下您的联系方式。
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