双特异抗体（BsAb）是作为新一代治疗药物，由于含有一个以上的抗原或表位识别位点，可以实现双重靶向，这种独特的能力使得bsAbs在生物医学研究和临床治疗中具有广泛的应用潜力。
由于其复杂的结构，双抗在下游纯化方面面临着挑战，包括一些异质性，稳定性，产品聚集等问题。其中产品聚集倾向被视为主要的挑战。本文比较了陶瓷羟基磷灰石（CHT）与离子交换去除双抗聚集体效果。其结果显示：
对于非对称和对称的lgG样的BsAbs，使用CHT纯化后纯度达到了97%以上，而且高分子量杂质（HMW）含量较低。
与CEX纯化比较，使用CHT可使层析诱导聚集体降低近8倍。
CHT同时可以有效去除低分子量杂质（LMW）
方法
双抗：CHO K1细胞培养产生，A,B,C
实验条件
实验结果
图1 CHT及CEX层析图谱
图2 观察到的层析诱导聚集
表1 Protein A 亲和层析后样品及CHT和CEX洗脱样品结果
从层析图谱（图1）和检测结果（图2，表2）可知：
1 聚集体去除：CHT不管是氯化钠洗脱还是磷酸钠梯度洗脱，对于聚集体去除效果都优于CEX。
2 纯度和产率：不同的结构的双抗，经过CHT纯化后产品纯度和产率都比较高；
3 色谱诱导聚集：经过CHT纯化时，色谱诱导聚集体明显降低。
4 HCP和其他杂质：CHT氯化钠梯度洗脱HCP清除率最高，增加磷酸盐浓度可以大量去除LMW。
陶瓷羟基磷灰石（CHT）
陶瓷羟基磷灰石，是一种无机混合基质填料，经过高温烧灼的颗粒球体，结构稳定，颗粒均匀，批次一致，同时具有阳离子交换和钙金属螯合作用两种分离机制。由于其独特的分离机制，条件摸索简单，高效的纯化效果，30多年的产业化应用，已经在在抗体，疫苗，核酸，酶和重组蛋白等生物药物纯化过程中发挥了重要的作用。
陶瓷羟基磷灰石（CHT）type II填料特性
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