灵芝中新三萜成分及其抗癌作用构效关系

     报道从灵芝中分离得到35种灵芝三萜其中包括5种灵芝三萜新化合物，通过采用乳腺癌细胞和肝癌细胞系，测试分离得到的灵芝三萜化合物活性，结合相应的三维定量构效关系（3D-QSAR）模拟分析化合物的结构与活性的关系，预测活性更好的结构，并采用反向找靶的方法对其中显示出最好活性的化合物3的作用靶标进行预测，其机理可能是通过靶向肿瘤坏死因子TNF-α发挥抗肿瘤作用。（Chen et al.,2016）

从灵芝子实体中分离得到5种新的三萜化合物

    作者首先从灵芝子实体开始，经乙酸乙酯提取，硅胶柱色谱分离，反向色谱柱分离和高效液相色谱分离得到35种灵芝三萜，其中包括5种是未见报道的三萜醇新化合物。

图1 从灵芝乙酸乙酯提取部分分离得到35种灵芝三萜化合物（来自（Chen et al.,2016））

图2  5种新灵芝三萜结构式（来自（Chen et al.,2016））

灵芝三萜对癌细胞毒性

     作者选用乳腺癌细胞MDA-MB-231和肝癌细胞HepG2两个癌细胞系，初步测试了分离得到的35种灵芝三萜化合物对这两种癌细胞系的抑制作用，结果显示化合物1-3对两种癌细胞具有高细胞毒性，化合物4、7、20、24具有适中的癌细胞毒性，其余化合物表现出较弱的抑制作用。在此基础上作者进一步通过细胞存活实验验证活性，化合物3同样表现出对乳腺癌细胞MDA-MB-231致死活性。

图3 化合物3和化合物20对乳腺癌细胞MDA-MB-231表现出明显很强的杀死效果（来自（Chen et al.,2016））

三维定量构效预测灵芝三萜化合物抑制乳腺癌细胞效果

    紧接着作者使用三维定量构效（3D-QSAR）预测灵芝三萜化合物对乳腺癌细胞MDA-MB-231效果。结果显示预测的IC50值和实验测得的IC50值一致性显著。

图4实验IC50与预测IC50显著一致（来自（Chen et al.,2016））

化合物3可能通过TNF-α作用靶点抑制癌细胞

    作者进一步探索了化合物3构效关系，通过3D-QSAR建模对接分析可以看到化合物3可能通过与肿瘤坏死因子TNF-α形成氢键，作用靶点达到抑制癌细胞作用。a和b为模拟化合物3范德华力网结构和电子势能结构网，c为化合物3与肿瘤坏死因子TNF-α相互之间作用对接二维结构图，d、e为化合物3与肿瘤坏死因子TNF-α对接三维结构图。

图5  3D-QSAR模拟评价化合物抗肿瘤的构效关系和对接分析预测化合物3的作用靶标（来自（Chen et al.,2016））

      至此，从灵芝中分离得到灵芝三萜化合物及其构效关系基本机制就比较清楚了：经过提取、分离、纯化、质谱确定的三萜化合物，细胞实验验证化合物活性，通过反向找靶和三维定量构效模拟说明灵芝三萜抗癌构效关系，由于分离所得纯化合物量比较少，论文作者下一步准备进一步通过合成得到更多灵芝三萜化合物3，证实新灵芝三萜的抗癌机理，而且有望发展为癌症的免疫疗法制剂。

    本文针对为从灵芝中分离三萜化合物设计和优化对乳腺癌效果实验作用机制研究设计的非常严谨，为天然产物活性物质抗肿瘤研究工作提供了非常有价值的参考。