在线拉曼光谱仪蛋白质分离过程监测
拉曼光谱仪蛋白质分离过程监测方案
在线拉曼光谱仪通过流通池连接在蛋白纯化层析系统的柱前或柱后，对上样样品或色谱柱分离出的样品实时测量拉曼光谱并通过进行定性和定量。
图1 布鲁克在线拉曼光谱仪与蛋白层析系统联用示意图
图2 BSA、CytC和缓冲液拉曼谱图
BSA（牛血清白蛋白）和CytC（细胞色素C蛋白）分离，我们用在线拉曼光谱仪分别获得BSA、CytC和缓冲液拉曼光谱图。然后将在线拉曼光谱仪配置流通池置于蛋白层析系统柱后监测BSA和CytC蛋白质分离过程检测。
图3 BSA和CytC定量模型
建立BSA和CytC蛋白质定量模型R2均高于0.99，将建好模型用于分离过程实时监测。
图4 蛋白质分离过程中BSA、CytC拉曼预测结果和紫外检测器结果
实验结果
布鲁克在线拉曼光谱仪的高通量增强狭缝技术，可以实现快速准确拉曼信号测量和分析。可以实现蛋白质分离过程柱前柱后蛋白质及基质的定性和定量，实时提供结果数据，有利于优化分离条件和提高分离效率。
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