移液器是我们实验工作中一种必要且重要的计量工具。在使用移液器的操作细节中，体现了我们的思考、细致、专业能力、知识储备以及对生命科学研究的严谨态度。见移液器操作，如见人性格与能力。
那么我们如何运用好移液工具，让我们的实验达到高效而又精准的成果呢？
这次，Eppendorf公司的熊老师和Vina老师从三个方面为大家做了分享：
PCR实验中常见的污染与防控对策
PCR检测流程中液体处理的注意事项
更多贴心Tips
【直播节选】
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PCR实验中常见的污染与防控对策
首先，PCR实验的流程包括样品DNA/RNA纯化、PCR和PCR产物分析。
在整个过程中，移液操作涉及其中：
> 60%操作步骤与移液操作密不可分
> 影响实验结果的1）可重复性2）一致性3）精准性
> 对于实验人员：操作的效率、舒适度
例如包括：
● 样本制备的试剂加入
● PCR反应体系的预混，混匀后再分装到PCR管/板（贴士：此处混匀步骤推荐使用混匀仪，让Tap酶分散均匀，不然会严重影响PCR的结果）
● PCR产物分析时凝胶电泳上样
……
应对PCR实验的污染来源，我们找到了3点关键控制点：
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►建议使用外置活塞式移液器M4
外置活塞式移液器M4的使用操作
（不用担心移液器枪体内受到气溶胶污染，且除水性溶液外，此原理移液器可精准移取挥发性强、黏度大等问题液体）
►推荐使用高端款Reference 2移液器
单按键Reference 2 的使用操作
它的单按键操作设计，能很好的防止气溶胶的污染。
►建议搭配epT.I.P.S.双滤芯吸头
使用气体活塞式移液器，建议搭配上epT.I.P.S.双滤芯吸头，近100%阻断气溶胶
PCR仪
Eppendorf PCR仪的热盖适应性好，一能减少反应体系的蒸发比例，减少气溶胶的产生；二是热盖适应性好，匹配市面上多种规格的PCR耗材。
合理的实验室布局
按步骤分区操作，各区间设置缓冲区，做好气流压力设置等
建议各区配备专用的移液器，有效地防止气溶胶的污染
具体更详细内容，请参考往期微文新冠肺炎疫情下，思考实验室建设与提升
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PCR检测流程中液体处理的注意事项
选择合适量程的移液器
移液器最大量程的30%-100%是最佳使用范围
挑选合适的吸头
吸头和移液器同等重要，一定要选择高质量的吸头，能保证高度的均一性和实验结果的重现性喔
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选择合适的移液量程工具
qPCR体系构建
20ul体系（反应体系配置）
200/1000ul、20/100ul单道、10ul单道，10ul8道排枪
PCR检测
20ul体系：2-20ul，20-200ul，100-1000ul
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装配吸头垂直轻压
吸嘴垂直插入吸头，轻压上紧，切勿上下敲击或左右摇晃
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调节刻度从大到小
● 不用时调节到最大刻度处，保护弹簧
● 调节旋钮，从大量程调节至小量程，精度最佳
● 从小量程调节至大量程，最好先调至略大一点，再返回
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问题液体的处理
►使用Research plus/Reference 2手动移液器
➝ 缓慢吸液和放液
➝ 反向移液
►推荐使用Multipette M4手动分液器或E3系列电动分液器
➝ 密封性活塞边缘使液体不会残留到分液管管壁
►如遇“易起泡液体”的移取，使用低吸附吸头
➝减少液体吸附，提高精准度
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提高96孔板分装效率
使用Multipette M4手动连续分液器→一分钟完成96孔板分装！
不仅快速准确，无需计算分液体系，且可重复性、一致性高。
当然了，8道/12道移液器都是非常不错的选择！
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PCR检测流程中的贴心小贴士
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变色冰盒，实验室颜值担当
温度指示冰盒
冷酷时它是深色，热情时（超过7℃）它是粉红或淡蓝，我们可以非常直观的判断冰盒的温度。
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96孔低吸附板，保证实验结果的最大回收效率
批次检测，不含DNA、DNase和PCR抑制剂，通过了第三方实验室认证。
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移液器清洁保养步骤
此次直播让我们一起学习了
① PCR实验中常见的污染
② 正确的移液操作
③ 如何使PCR移液操作更精准
移液操作是我们在实验中运用频率和次数最高的操作，好的移液操作不仅能带来准确的、可重复性高的实验结果，而且能延长移液工具的使用寿命。
用好移液器，走遍任何实验室都不怕了。移液操作是你实验旅途中一道不可或缺且可以很唯美的风景。
好了，本期直播分享就到这里，希望对您有所帮助。
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