
在前文中我们提到,活性氧自由基(ROS)主要来源于线粒体(包括H2O2和O2·-等),ROS过多可导致细胞中重要的生物大分子(例如:蛋白质、核酸等)氧化损伤,引起机体衰老、组织损伤、糖尿病以及肿瘤等。

线粒体呼吸链是线粒体ROS的主要参与者,由线粒体内膜上负责电子传递的5个复合物(Ⅰ-Ⅴ)组成,是哺乳动物细胞ATP产生的主要场所。在传递电子的同时,复合物Ⅰ和Ⅲ会漏出少量电子参与氧自由基的形成[1]。
在正常情况下,细胞内的氧化/抗氧化系统处于平衡状态,细胞内只有少量的ROS,并不会对细胞造成损伤。
但是当组织细胞损伤时,细胞内线粒体呼吸链复合物Ⅰ和Ⅲ会漏出大量的电子,参与产生大量的ROS(如下图所示),使得细胞内氧化抗氧化系统失衡,造成线粒体功能受损,进而导致线粒体自噬、细胞凋亡等现象的产生[2]。

虾青素(Astaxanthin, AX)是一种脂溶性的非维生素A类胡萝卜素,有多种药理作用,如抗炎、抗氧化、抗肿瘤及增强免疫力等。
在前文中我们提到,由于其具有脂溶性的特点,AX可以穿过细胞膜和细胞器膜磷脂双分子层,进入线粒体中,有研究显示,AX能靶向集中于线粒体中[3],这就有希望打破ROS释放过多导致的恶性循环(ROS释放过多→线粒体损伤→ROS大量释放→线粒体结构和功能进一步损伤→细胞衰老/凋亡)。
人体存在着抗氧化损伤的天然防御系统[3],这个系统是由破坏性因子(例如H2O2和O2·-等)、代谢产物(例如丙二醛等)、以及各种抗氧化酶组成,其中抗氧化酶是重要的组成部分(如下图示)。抗氧化酶主要分为三大类SOD(过氧化物歧化酶),CAT(过氧化氢酶),GPX(谷胱甘肽过氧化物酶)。
SOD的主要功能是将超氧阴离子(O2·-)催化为过氧化氢,抑制了O2·-对细胞造成损伤。当然,过氧化氢也是一种超氧化合物,也会对组织细胞造成损伤,这个时候,过氧化氢酶就会将过氧化氢分解为水和氧气。

因此,通过观察虾青素对氧化损伤的线粒体(H2O2所致)中丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)含量和超氧化物歧化酶(SOD),就可以得出虾青素是否具有保护线粒体氧化损伤的作用。
国家教育部抗肿瘤天然药物工程研究中心的曹秀明博士早在2010年就对此做了相关的研究[4],首先,他们从大鼠肝脏中分离出来了线粒体蛋白混悬液,并将实验分为对照组、H2O2损伤组、虾青素组(三种剂量)和维生素C组(如表1)。

通过测定不同组别中,各种分子及酶的含量,他们发现过氧化氢损伤后,线粒体中MDA和NO含量升高,GSH含量降低,SOD和ATPase活性降低。
(1)虾青素高剂量组可明显抑制活性氧所致MDA含量升高
生物体内,自由基作用于脂质发生过氧化反应,氧化终产物为丙二醛(MDA),会引起蛋白质、核酸等生命大分子的交联聚合,且具有细胞毒性。
脂质氧化终产物MDA在体外影响线粒体呼吸链复合物及线粒体内关键酶活性,它的产生还能加剧膜的损伤,因而测试丙二醛的量可反映机体脂质过氧化的程度,间接的反应出细胞损伤的程度。
由图可见,H2O2损伤组线粒体中MDA含量明显高于对照组(差异有显著统计学差异,P<0.01);虾青素高剂量组可明显抑制活性氧所致MDA含量升高(与对照组无显著统计学差异,P>0.05)。

(2)虾青素对线粒体GSH含量的影响
谷胱甘肽存在于所有动物细胞中,在正常情况下,以其硫醇还原性存在,是细胞内主要的非蛋白质巯基化合物,在许多生命活动中,起着直接或间接的作用包括基因表达、酶活性和代谢调节、对细胞的保护等。
它与谷胱甘肽过氧化酶共同作用,使过氧化氢还原成水。由下图可见,H2O2损伤组线粒体中GSH含量明显低于对照组(差异有显著的统计学意义,P<0.01);
虾青素高剂量组可明显抑制活性氧所致GSH含量的降低(与对照组无显著差异,P>0.05)。

(3)虾青素对线粒体SOD含量的影响
SOD是生物体内重要的抗氧化酶,广泛分布于各种生物体内,SOD在生物体内的水平高低意味着衰老与死亡的直观指标,SOD可对抗与阻断因氧自由基对细胞造成的损害,并及时修复受损细胞,修复因自由基造成的对细胞伤害。

由下图所可见,H2O2损伤组线粒体SOD活性明显低于对照组(差异有显著的统计学意义,P<0.01)。
虾青素高剂量组可明显抑制活性氧所致SOD活性的降低(与对照组无显著差异,P>0.05)。

从以上实验结果可以看到天然虾青素在保护线粒体免受ROS氧化损伤方面有积极意义,并且要给予合适的剂量,因此,在我们日常补充虾青素时,最好服用高纯度的精华虾青素。
例如,10%浓度的油状精华虾青素,避免服用粉剂型虾青素,中低浓度虾青素(例如5%浓度和1%浓度的虾青素),由于人体自身并不能虾壳,雨生红球藻等动植物中将虾青素提取出来,所以,直接服用雨生红球藻粉剂是一点作用都没有的。
参 考 文 献

