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文献分享|跟着Cell学习蛋白质复合物的定量表征

文献分享|跟着Cell学习蛋白质复合物的定量表征 进科驰安
2024-11-26
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导读:蛋白质复合物的定量表征与生物学中每一个科研课题息息相关,单分子质量光度系统具备用量少、测试时间短、分子量覆盖广及分子量分辨率高等优点,加上无与伦比的复合物定量计量学,是分析和表征蛋白质复合物的理想方法

单分子质量光度分析系统(Mass photometer)是全新的生物分子分析和表征系统,仅需极少量的样品就能获得生物分子在天然状态下的质量分布,并且无需任何的标记和固定。该方法尤其适用于蛋白质复合物的分析和表征,并且越来越多的研究工作已经发表在高水平杂志上。今天,小编简单介绍两篇发表在Cell杂志上的科研工作,供大家借鉴参考。

2024年9月份,北京大学李晴教授联合哈佛医学院、霍华德休斯医学研究院在Cell发表了题目为‘A replisome-associated histone H3-H4 tetramer chaperone required for epigenetic inheritance’的研究论文,证实了复制叉保护复合物Mrc1中存在与组蛋白H3-H4四聚体的结合区域。文章中,科学家们使用质量光度系统分别检测了(H3-H4)2四聚体以及Mrc1-(H3-H4)2复合物的分子量分布,结果如图1:

图1 Mrc1-(H3-H4)2复合物与(H3-H4)2四聚体的结构预测图及分子量分布图

MP测量H3-H4二聚体以及其与Mrc1组成复合物的分子量分别为51kDa、82kDa,与理论分子53kDa和81.7kDa吻合的非常好。

10月25日,西奈山伊坎医学院时毅教授联合牛津大学章培君教授Cell上报道了光谱抗病毒平台AMETA,为解决现有疫苗和抗体治疗过程中病毒的突变逃逸提供了全新的策略。AMETA平台由双特异性的纳米抗体(Nb)和人Igm骨架构建而成,能够同时靶向多个保守表位,将单个病毒的抗病毒效力提高了一百万倍。

文章中,科学家们使用质量光度分析系统表征了5个IgM-Fc复合物与20个纳米抗体组装的多价体系,结果如图2
图2 光谱抗病毒平台AMETA示意图与组装体的分子量分布图

数据表明:组装体Nb-IgM-Fc与IgM-Fc五聚体的分子量相差约为300-400kDa,这个数值与20个纳米抗体的分子量(单个纳米抗体的分子量在15-20kDa左右)吻合的非常好。

与用于蛋白质复合物分析和表征的其他技术相比,单分子质量光度系统具备测量范围广(30kDa-5MDa),分辨率高(最高可达~25kDa),如果您也想快速分析和表征蛋白质复合物,联系我们吧!

参考文献:
1、A replisome-associated histone H3-H4 chaperone required for epigenetic inheritance, Cell, 2024,187:5010-5028
2、Adaptive multi-epitope targeting and avidity-enhanced nanobody platform for ultrapotent, durable antiviral therapy, Cell, 2024, doi: 10.1016/j.cell.2024.09.043

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