使用CLARIOstar Plus酶标仪测定植物样品和食品中的抗氧化能力

氧自由基吸收能力（ORAC）检测是一种实验室测试，用于测量食品单位质量的抗氧化能力。它通常与TEAC、FRAP、TRAP、Folin、DPPH和CUPRAC等测定法结合使用。这些测试通常用于评估食品中和自由基的功效。

自由基是在正常代谢过程中（如进食和呼吸）以及外部因素（如污染和吸烟）中产生的。当自由基过度生成或正常代谢过程无法有效清除自由基时，可能导致多种疾病（如糖尿病、肾缺血、动脉粥样硬化和癌症）以及加速衰老。摄入抗氧化能力较强的食品可以帮助降低体内自由基浓度。尽管目前尚无充分数据证明食品的抗氧化能力与健康效果之间存在直接相关性，但人们普遍认为，富含抗氧化物质（如水果和蔬菜）的饮食对健康有益。因此，ORAC 检测作为评估食品抗氧化能力的重要研究工具仍具有很高的价值。

在 ORAC 检测中，荧光素与 AAPH 发生反应（见图 1）。随着反应进行，荧光强度逐渐下降。如果样品不具有抗氧化能力（仅含缓冲液），荧光会迅速减弱，导致荧光曲线下的面积（AUC）变小。仅含缓冲液的样品被用作空白对照。

图1：AAPH的热分解会生成自由基，与荧光素发生反应，生成无荧光产物。

在本研究中，ORAC检测法用于测试叶提取物、植物饮料、果汁和混合浆果的抗氧化能力。为了对未知样品的抗氧化能力进行分类，测得的 AUC 数据将与具有良好表征的抗氧化剂标准曲线进行比较。本研究中，使用了Trolox（维生素E等效物）作为标准抗氧化剂。与空白对照一起，在黑色96孔板中绘制了Trolox（800 µM - 25 µM）的标准曲线。最后，除了空白对照和Trolox标准曲线外，还制备了食物样品的10倍稀释系列，并在与Trolox标准和空白对照相同的条件下与荧光素和AAPH反应。通过在CLARIOstar Plus 中测量荧光素在37°C下的荧光强度，并使用动态范围扩展技术每90秒测量一次，持续160分钟，确定所有孔的AUC。根据食品样品的浓度落在Trolox标准曲线范围内，计算得出对应的抗氧化能力值，单位为µM TE（Trolox当量）/100克样品。