传统的维持年龄同步种群以进行多日研究(无需干预)的方法劳动强度大且通量低,这阻碍了对衰老机制的研究以及新型衰老干预措施的发现。为了解这些局限性,我们开发了一种新颖、稳健的方法,能够在96孔板液体培养格式中维持年龄同步种群长达12天,且无需定制设备。通过优化多孔板和一次性耗材的表面组成,并完善培养参数(包括生命阶段、培养基成分和细菌食物浓度),该方法的稳健性得到了显著提高。为了在整个生命周期中进行无偏见的表型评估,我们使用了WMicrotracker ONE读数器来监测多孔板中线虫的运动和活力。使用我们方法观察到的整体健康度随衰老的下降趋势,与在固体琼脂上维持的线虫相当。
在本研究中,我们开发了一个新平台,用于在没有任何化学试剂或基因干预的情况下,在液体培养中长期维持年龄同步的秀丽隐杆线虫(C. elegans)种群,以进行高通量(HT)筛选(图1)。该方案从预先在固体线虫生长培养基(NGM)上培养的第1天成虫开始。与传统方法不同,该方法不需要漂白处理,从而避免了漂白可能引起的表型变化,并支持线虫使用活性和非活性食物来源,从而能够在严格控制的环境中进行基因和化合物筛选。
我们的结果表明,我们这一稳健的平台(Z因子超过0.7)可用于化学库的高通量筛选,并可能用于专注于成虫秀丽隐杆线虫种群的基因组研究。其可扩展性和适应性使其成为依赖化学试剂的年龄同步技术的稳健替代方案,对衰老及相关领域的研究具有重要意义。高通量筛选(HTS)的关键挑战之一是在获取大量数据以供分析的同时最大化效率。上述方法与WMicrotracker ONE技术相结合,无疑将加速高通量筛选过程。
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