NMR平台：50mg冻干粉/样=500mg鲜重/样
GC-MS平台：20mg冻干粉/样=200mg鲜重/样
LC-MS平台：20mg冻干粉/样=200mg鲜重/样
2.1 每个生物学重复取相同的一体积细胞悬浊液，经4℃、1000-3000rpm、5min离心处理，去除培养液（至少保证1Volume=N×10^7cells，N>1。为得到最好的分析结果，建议每个生物学重复的在不计算管壁粘附的情况下湿重达到200mg以上）；
2.2 将收集到的样本使用PBS或生理盐水清洗3-5次，经4℃、1000-3000rpm、5min离心处理，去除胞外物质；
2.3 将收集到细胞样本在液氮中进行淬灭处理，抑制细胞中的代谢活性；
2.4 将淬灭过的细胞样本放入-80℃储存；或进行冷冻干燥，最终得到冻干粉末，-80℃进行长期保存。
3.1 去除培养基和胞外物质的过程中，尽量选择低速离心，防止细胞破裂；
3.2 采样全程保证容器无菌，避免外界容器对样本的污染；
3.3 提前分装，避免反复冻融。
冻干粉样本在运输过程中可使用冰盒运输，非冻干样本需使用足量干冰保温运输。
冻干样本如需长期保存建议进行过塑或充氮处理，湿样若长期保存建议-80℃储存。
1、重要的事情说三遍~~
避免反复冻融！
避免反复冻融！
避免反复冻融！
绝大多数冷冻实验样本都有避免
反复冻融的要求，应养成好习惯，
尽量在初次冷冻之前分装。
2、足量干冰的意思是：
样本直到运到实验平台开箱时，
都应保持最初的冷冻状态，确
保温箱内剩余干冰不少于1kg，
理论上干冰越多越好，但考虑
到干冰采购和运输成本问题，
够用即可，通常情况，30-35℃
气温时，以每日不少于3kg挥发
量估算为宜，气温更高时应加量。
3、还有一个不容忽视的问题：
寄送样本应选用最快的物流方式，
尽量避开“6.18”“双11”“双12”“年货
节”之类的电商混战日和节假日，
到达时间尽量避开节假日和周末。
最后说一句：
科研道路千万条，影响因子第一条，
方法整不对，说啥都是泪……
