酒精性肝病(Alcoholic liver disease, ALD)是由长期过量饮酒或酗酒所引起的肝损伤,包括酒精性脂肪肝、酒精性肝炎、酒精性肝纤维化、酒精性肝硬化。目前酒精性肝损伤已成为仅次于病毒性肝炎的第二大类肝病,是发展为肝硬化较为常见的原因。酒精对肝脏的损伤缺乏特异性药物,因此,寻求有效的抗酒精性肝病的药品和食品具有重要的意义。
人参(Panax ginseng C.A.Mey.)是五加科多年生草本植物人参的干燥根及根茎,被证实具有良好的抗癌、保护心脑血管系统、保护神经系统和抗衰老等活性。近年来的研究表明,人参对各种实验性肝损伤有一定的保护作用,主要是通过抗氧化、抗炎等作用保护和调节肝功能。
枳椇子(Hovenia dulcis Thunb)为鼠李科拐枣属植物枳椇的种子,具有解酒毒,止呕,清热利尿等功效。有研究表明枳椇子对小鼠过量饮酒导致的酒精性肝损伤有预防作用,此外,枳椇子还能够减轻酒精引起的大鼠肝脏脂肪变性及炎症细胞浸润,减少纤维增生。已有研究证实人参和枳椇子合用对小鼠乙醇中毒具有保护作用,但两者配伍的研究鲜有报道,并且作用机制等尚未完全明确。
中国农业科学院特产研究所孙印石研究员团队通过建立急性酒精诱导小鼠肝脏损伤模型,观察使用不同配伍比例的人参枳椇子提取物对酒精性肝损伤引起的氧化应激、肝脂质异常沉积、炎症因子释放的影响,检测了小鼠血清和肝脏相关生化指标,探讨人参枳椇子对小鼠肝损伤的预防作用机理,为人参和枳椇子的进一步开发利用提供参考依据和理论基础。
人参枳椇子提取物对小鼠酒精性肝损伤的保护作用
李志满,邵紫君,李珊珊,华 梅,孙印石*
目的:研究人参枳椇子提取物对酒精所致小鼠急性肝损伤的保护作用。
方法:不同配伍比例的人参枳椇子提取物以100 mg/kg的剂量连续灌胃小鼠3 d后,除正常组外,其余各组小鼠给予体积分数为50%的乙醇(6 g/kg·bw)灌胃,建立一次性暴饮小鼠急性酒精性肝损伤模型。在给予酒精12 h后处死小鼠,检测各组小鼠血清中天冬氨酸氨基转移酶(Aspartate aminotransferase,AST)、丙氨酸氨基转移酶(Alanine aminotransferase,ALT)的活力及甘油三酯(Triglyceride,TG)、高密度脂蛋白胆固醇(High-density lipoproteins,HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(Low-density lipoproteins,LDL-C)的含量,肝脏中谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathione peroxidase,GSH-Px)、超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)的活力及还原型谷胱甘肽(Glutathione,GSH)、丙二醛(Malondialdehyde,MDA)含量。利用酶联免疫吸附法测定血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)的含量变化,并用反转录PCR法检测TNF-α和IL-1β的基因表达水平。
表1 实时定量PCR 反应引物序列
Table 1 Sequences of primers for RT-PCR amplification
目的基因 |
引物序列(5'—3') |
TNF-α |
CTATTCATACTCGTGCTCTGG GGTCTTTCAACAAGGTGCT |
IL-1β |
CCTGTACGATCACTGAACTG TTGGGATCTACACTCTCCAG |
GAPDH |
ATGGTGAAGGTCGGTGTGAA CGCTCCTGGAAGATGGTGAT |
结果:与模型组小鼠比较,人参枳椇子提取物能够明显降低由急性酒精摄入引起的血清中AST、ALT活力的升高(p<0.05);降低血清中TG、LDL-C的含量(p<0.05),升高HDL-C的水平(p<0.05),改善脂质代谢失衡;提高肝组织中抗氧化酶SOD和GSH-Px的活力(p<0.05),减少肝组织中GSH损耗并抑制肝组织中MDA含量增加(p<0.05),提高抗氧化能力保护肝脏损伤;下调炎症因子TNF-α、IL-1β的表达来减轻炎症损伤(p<0.05)。

图5 人参枳椇子提取物对小鼠肝组织中TNF-α和IL-1β mRNA表达的影响
Fig.5 Effects of PHE on the expression of TNF-α and IL-1β mRNA of liver tissure in mice
结论:人参枳椇子提取物对急性酒精诱导的小鼠肝损伤有明显的保护作用。


