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吉林农业大学于寒松教授等综述了大豆皂苷的结构和分类、理化性质、影响大豆皂苷含量的因素,介绍了大豆皂苷的提取及纯化工艺、检测方法,总结了大豆皂苷的生物学活性,及其在食品、药品、化妆品多领域的应用。


A族皂苷是由大豆皂醇A在C-3和C-22位结合2个糖链所形成,并在C-22位连接有乙酰化糖链基团;DDMP族皂苷是由大豆皂醇B在C-3和C-22位分别结合1个糖链和DDMP基团(2,3-二氢-2,5-二羟-6-甲基-4H-吡喃-4-酮)所形成;B族皂苷是单糖链皂苷,是由DDMP族皂苷C-22位失去DDMP基团所形成;E类皂苷是B类皂苷C-22位氧化形成的。
A族大豆皂苷的糖基乙酰化是大豆具有苦味和涩味的重要原因之一。B族、E族、DDMP族皂苷则是使皂苷具有多种生物学活性的重要成分。其中B族皂苷含量较多,但只存在于大豆胚芽中;E族皂苷是B族皂苷的光氧化产物,占总含量较少,主要分布在大豆胚芽中;DDMP族皂苷不稳定,容易降解形成B族皂苷和E族皂苷。
大豆皂苷是灰白色粉状物质,食用时具有辣味和苦涩感,对人体粘膜具有刺激性。大豆皂苷在常温下稳定,可溶于水,易溶于热水、热甲醇和热乙醇,难溶于苯、正己烷、乙醚、石油醚等极性较小的有机溶剂。大豆皂苷通常在熔融前受热分解,因此无明确熔点。作为三萜类化合物,大豆皂苷具有三萜类化合物共有的理化性质。
大豆皂苷为酸性皂苷,其水溶液呈酸性,加入中性盐类物质容易产生沉淀。此外,大豆皂苷可发生显色反应,与苯反应生成红棕色沉淀;在冰醋酸-乙酰氯溶液中呈红色;在氯仿-硫酸溶液中呈绿色,与五氯化锑反应后呈蓝紫色。因此,可以根据与以上物质的颜色反应来鉴定大豆皂苷。
使用单一的溶剂提取方法虽然可以得到大豆皂苷,但获取纯度较低,耗时久,因此市面常用辅助方法进行联合提取,不仅能提高大豆皂苷的提取效率,还可以节约溶剂成本、节省提取时间。但目前使用的提取方法所得到的大豆皂苷纯度仍难以达到市场要求,因此大豆皂苷高效提取纯化方法依然是目前研究大豆皂苷的一个关键性问题。
提取大豆皂苷还有许多其他的辅助方法可以提高得率和质量,如采用微波辅助法提取大豆皂苷,通常作为溶剂法提取皂苷的辅助方法,可以有效提高溶剂法提取大豆皂苷的效率和产率。使用微波法提取大豆皂苷,微波功率中火、微波时间1.5 min、乙醇80%、料液比1:25 (W/V),大豆皂苷的最佳提取率可达0.916%。利用超声波辅助法与溶剂法提取大豆皂苷,和微波法一样,可以有效提高大豆皂苷的提取率,并提高溶剂法提取的效率。辅助提取法不仅能缩短提取时间、使原料受热均匀,还能够提高提取率和纯度。
层析分离法是纯化大豆皂苷的常用方法,包括吸附层析法和高效液相色谱法。吸附层析法常用的层析剂有硅胶和Al2O3,洗脱溶剂通常使用混合溶剂。高效液相色谱法是近年来流行的分离纯化大豆皂苷的技术,提取出的大豆皂苷纯度较高,多用于制备大豆皂苷单体,可以在很大程度上提高大豆皂苷的纯度,多用于实验室制备皂苷。严明霞等建立了大豆皂苷的分离纯化方法,使用70%乙醇溶剂法提取脱脂大豆粉中大豆皂苷粗提物,并利用葡聚糖凝胶色谱法,用甲醇洗脱,分离大豆皂苷和异黄酮,最终得到纯度较高的大豆皂苷粉末。并使用制备型高效液相色谱制备,得到9种高纯度的大豆皂苷单体。层析分离法灵敏度高,所需上样量少,且能得到高纯度样品,但分析时间长,制备大量样品耗时久。
目前,大豆皂苷的检测方法主要包括光谱法、薄层色谱法、液相色谱法、液相色谱串联质谱法、比色法等。
比色法是检测大豆皂苷常用的方法,通常为香草醛-高氯酸法。此方法检测大豆皂苷,糖类的干扰较小,因而会得到相对准确的数值。皂苷溶解后,在酸性条件下水解,用乙酸乙酯萃取苷元,与香草醛-高氯酸反应,在560 nm波长下测定吸光度,与标准曲线对比进行定量。比色法用于检测大豆皂苷方法简便,检测迅速,但检出限高,难以检出低浓度样品,且定值需要对照品或纯品进行对比。因此比色法检测大豆皂苷应用较少。
大豆皂苷的检测方法繁多,且都能够对大豆皂苷进行定量分析,但因缺少大豆皂苷纯品对照,使检测结果容易出现误差。因此想要精准测定大豆皂苷,应致力于研发大豆皂苷单体的标准物质,用于检测对照。

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