食品工业科技编辑部

2020-04-08

乳酸菌的表层蛋白（Surface layer protein，简写为 S-layer protein、SLP），又称S-层蛋白，指通过非共价作用，连接于多数细菌和古生菌的细胞壁和细胞膜最外层的蛋白结构。近年来陆续有研究发现，表层蛋白对乳杆菌发挥益生功能有着卓著的贡献。表层蛋白通过抑制致病菌、调节免疫功能、作为乳酸菌黏附宿主的介质与宿主表面物质特异性结合，从而发挥乳酸菌的一系列益生作用。目前，对L. acidophilus 的表层蛋白研究最广泛且较深入。

L. acidophilus KLDS1.0901分离自内蒙古发酵酸马奶，具有良好的耐酸、耐碱盐特性，能抑制致病菌的生长，改善腹泻。东北农业大学霍贵成教授团队从体外探究了L. acidophilus KLDS1.0901的浓度、生长阶段以及其表面的表层蛋白对其黏附Caco-2细胞的影响，并通过体内试验进行验证；通过5 mol/L-LiCl处理提取菌体表面的相关蛋白，并通过透射电镜和SDS-PAGE进行分析鉴定；初步探讨KLDS1.0901的黏附机制，分析其表层蛋白的特性。

嗜酸乳杆菌KLDS1.0901表层蛋白对菌株黏附特性的影响

占萌，李慧臻，王娜娜，焦雯姝，霍贵成^*

（东北农业大学，乳品科学教育部重点实验室，黑龙江哈尔滨 150030）

目的与方法：采用体外实验探究了嗜酸乳杆菌KLDS1.0901的浓度、生长阶段、表层蛋白对其黏附Caco-2细胞能力的影响，并将未处理、去除表层蛋白和热致死的KLDS1.0901采用荧光标记后灌胃给小鼠，取不同部位的肠黏膜，进行流式细胞检测。通过透射电镜和SDS-PAGE对表层蛋白粗品进行分析鉴定。

结果：随着菌体浓度的增加，KLDS1.0901黏附率增大至浓度为108 CFU/mL，黏附率达到饱和。菌体处于对数生长末期时，黏附特性更优。

图3 不同生长阶段对 KLDS1.0901黏附 Caco-2 的影响

Fig.3 Theeffects of different growth stages on the KLDS1.0901 adhesion to Caco-2

Caco-2单细胞层与表层蛋白共同孵育1 h黏附量显著下降（P<0.05），且加入的表层蛋白浓度越高，对其黏附抑制作用越强。

图5 cFDA-SE标记荧光染料标记乳酸菌的效果

Fig.5 Effect of cFDA-SE fluorescent dye labelinglactic acid bacteria

注：A：未标记的KLDS1.0901；B：标记的KLDS1.0901；C：标记的去除SLP的KLDS1.0901 D：标记的热致死KLDS1.0901。

未处理的KLDS 1.0901细胞壁外围包裹着一表层结构，但除去表层蛋白后表层结构即消失。

未处理的KLDS1.0901 (20000×)

处理过的KLDS1.0901 (20000×)

图7 透射电镜观察嗜酸乳杆菌的表层结构

Fig.7Observation ofthe cell surface structures by transmission electron microscopy

表层蛋白粗品中表层蛋白含有含量约为15.6%，且分子量在43 kDa左右。

图9 嗜酸乳杆菌 KLDS1.0901 LiCl提取物的 SDS-PAGE电泳图

Fig.9 SDS-PAGE of LiCl extractions from L. acidophilus KLDS 1.0901

结论：嗜酸乳杆菌KLDS1.0901含有丰富的表层蛋白，且能较好的黏附于小鼠肠道，具有益生菌的潜力。

本文《嗜酸乳杆菌KLDS1.0901表层蛋白对菌株黏附特性的影响》来源于《食品工业科技》2019年40卷5期，引文格式为：占萌，李慧臻, 王娜娜,等. 嗜酸乳杆菌KLDS1.0901表层蛋白对菌株黏附特性的影响[J].食品工业科技，2019,40(5):144-150. 点击下方阅读原文获取全文信息。