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文章AI智能精读|华南农业大学食品学院周爱梅教授:老香黄多糖的分离纯化及其体外胃黏膜保护活性研究

文章AI智能精读|华南农业大学食品学院周爱梅教授:老香黄多糖的分离纯化及其体外胃黏膜保护活性研究 食品工业科技编辑部
2024-11-04
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导读:欢迎投稿EI期刊《食品工业科技》www.spgykj.com

华南农业大学食品学院,广东展翠食品股份有限公司,华农(潮州)食品研究院有限公司阳丹,蔡舒,彭成海,陈树喜,周爱梅等人探讨了老香黄多糖的分离纯化及其对体外胃黏膜的保护活性。研究发现,老香黄多糖能有效保护和修复人胃黏膜上皮细胞,特别是在乙醇损伤和划痕实验中显示出显著的细胞保护作用。通过分离纯化,筛选出具有高胃黏膜保护活性的老香黄多糖组分,为后续体内活性评价和功能食品开发提供科学依据。



摘要:本文以老香黄多糖为研究对象,探究其胃黏膜保护活性。首先采用热水浸提法提取老香黄多糖,进而通过Sevag试剂脱蛋白、DEAE-52纤维柱和CL-6B琼脂糖凝胶柱进行多糖的分离纯化,最后采用乙醇损伤人胃黏膜上皮细胞(Human gastric mucosal epithelial cells, GES-1)细胞模型及GES-1细胞划痕损伤模型探究其体外胃黏膜保护活性。结果表明,老香黄多糖经纯化后共得到6个组分,分别为PFCP、PFCP-1、PFCP-2、PFCP-3、PFCP-2-1、PFCP-2-2。在乙醇损伤GES-1细胞实验中,老香黄多糖各分离纯化组分均能提高细胞活性,增强细胞超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)酶活,减少丙二醛(MDA)含量,从而增强细胞抗氧化能力,减轻黏膜损伤。其中PFCP-2-1(50 μg/mL)提高SOD酶活和降低MDA含量效果最佳,PFCP-2-1(5 μg/mL)提高CAT酶活效果最佳,与模型组相比均有显著性(P<0.05),且优于替普瑞酮阳性药物组。在GES-1细胞划痕损伤实验中,老香黄多糖各个组分均能加速损伤区域胃上皮细胞的生长, 促进细胞向损伤区域迁移,恢复胃黏膜上皮细胞的完整性,阳性药物的划痕修复率最佳,其次是PFCP-2-1(50 μg/mL)组分,两者无显著差异(P>0.05)。综上所述,老香黄多糖PFCP-2-1可能通过提高细胞抗氧化能力,以及促进GES-1细胞增殖、迁移发挥胃黏膜保护活性。


PART.01
结果

主要介绍了老香黄多糖的分离纯化过程及其对GES-1细胞的胃黏膜保护活性。通过DEAE-52纤维柱和琼脂糖凝胶CL-6B柱分离纯化得到PFCP-2组分,其得率较高。实验结果显示,老香黄多糖能显著提高GES-1细胞的存活率和抗氧化酶活性,减少脂质过氧化产物MDA的生成,从而对乙醇诱导的胃黏膜损伤具有保护作用。特别是PFCP-2-1组分,在浓度为100 μg/mL时,显示出最佳的保护效果,能有效促进细胞的修复和迁移。


表 1 提取纯化样品糖含量和得率 

Table 1 Sugar content and yield of extraction and purification samples

图 1 PFCP 的 DEAE-52 纤维素阴离子交换色谱柱洗脱曲线图 

Fig.1 Elution profiles of DEAE-52 cellulose anion-exchange chromatography column of PFCP

图 2 PFCP-2 的琼脂糖凝胶 CL-6B 凝胶色谱柱洗脱曲线图 

Fig.2 Elution profiles of Sepharose CL-6B gel column of PFCP-2


图 3 老香黄多糖对 GES-1 细胞增殖活力的影响 

Fig.3 The effect of Laoxianghuang polysaccharides on the proliferative viability of GES-1 cells 

注:不同小写字母表示差异显著(P<0.05)。

图 4 不同乙醇浓度对 GES-1 细胞存活率的影响 

Fig.4 Effect of different ethanol concentrations on the survival rate of GES-1 cells


图 5 老香黄多糖对乙醇损伤 GES-1 细胞活力的影响 

Fig.5 Effect of Laoxianghuang polysaccharide on the viability of ethanol-damaged GES-1 cells 

注:不同小写字母代表差异显著(P<0.05),*表示与模型组相 比差异显著 (P<0.05) ;**表示与模型组相比差异极显著 (P<0.01);图 6~图 8 同。


图 6 老香黄多糖对乙醇损伤 GES-1 细胞内 SOD 分泌量的影响 

Fig.6 Effect of Laoxianghuang polysaccharide on the secretion of SOD in ethanol damaged GES-1 cells 

注:ns 表示无显著差异。


图 7 老香黄多糖对乙醇损伤 GES-1 细胞内 MDA 分泌量的影响 

Fig.7 Effect of Laoxianghuang polysaccharide on the secretion of MDA in ethanol damaged GES-1 cells


图 8 老香黄多糖对乙醇损伤 GES-1 细胞内 CAT 酶活的影响 

Fig.8 Effect of Laoxianghuang polysaccharide on the secretion of CAT in ethanol damaged GES-1 cells


图 9 老香黄多糖对 GES-1 损伤后的修复效果对比 

Fig.9 Comparison of the repair effect of Laoxianghuang polysaccharide on GES-1 after damage 

注:不同小写字母代表有显著差异(P<0.05),*表示与控制组相比差异显著(P<0.05);**表示与控制组相比差异极显著 (P<0.01)。


图 10 划痕修复效果对比图

Fig.10 Scratch repair effect comparison graph 

注:蓝色条带内为划痕损伤区域;控制组用培养基处理,阳性对照组用 80 μmol/L 的替普瑞酮处理;划痕损伤修复面积使用 imageJ 软件计算。

PART.02
结论

本文总结了老香黄多糖的分离纯化过程及其体外胃黏膜保护活性研究结果。通过多步骤纯化,得到六组多糖,其中PFCP-2-1显示最强的胃黏膜保护活性。PFCP-2-1能显著提高GES-1细胞的抗氧化酶活性,降低氧化应激产物MDA水平,有效保护胃黏膜免受酒精损伤。此外,PFCP-2-1还能促进细胞增殖和迁移,进一步增强其保护作用。

引用本文:阳丹,蔡舒,彭成海,等.  老香黄多糖的分离纯化及其体外胃黏膜保护活性研究[J]. 食品工业科技,2023,44(19):440−448. doi:  10.13386/j.issn1002-0306.2023010008.


Citation: YANG Dan, CAI Shu, PENG Chenghai, et al. Studies on Isolation, Purification and Gastric Mucosal Protective Activity in Vitro of Laoxianghuang Polysaccharide[J]. Science and Technology of Food Industry, 2023, 44(19): 440−448. (in Chinese with English abstract). doi:  10.13386/j.issn1002-0306.2023010008.


基金项目: 潮州市科技项目(2020ZX03)。


通信作者简介

周爱梅,博士,教授,博士生导师。为广东省高校天然活性物国际科技合作创新平台副主任、广东省功能食品活性物重点实验室及广东省天然活性物工程技术研究中心骨干成员。曾担任广东省食品工业协会食品添加剂分会常务理事、广东省食品行业协会专家委员会技术组专家等社会兼职,现担任国家食药同源产业科技创新联盟理事、广东省水产标准化技术委员会委员、广东省食品学会海洋食品专业委员会委员等兼职。主要从事食品化学与功能食品活性物、农产品与水产品精深加工与综合利用等领域的教学科研工作。总计在国内外核心期刊发表论文近170篇;主持国家自然科学基金项目2项;主持省部级课题20多项,包括:广东省自然科学基金面上项目2项、广东省重大人才工程“扬帆计划”引进创新创业团队项目1项、广东省教育部产学研结合项目2项、广东省科技厅中央引导地方科技发展专项1项等;参加国家、省部级等项目40多项;作为第一发明人申请国家发明专利20多项,已授权13项,其中2项专利已成功转让;获得2023年中国商业联合会科学技术进步奖二等奖等多项荣誉。


(以上信息来自华南农业大学官网)


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