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划痕实验
细胞划痕实验是最简单最经济的、研究细胞迁移和修复能力体外实验方法,这种方法可以在一定程度上模拟体内细胞的迁移过程,也可以作为体外细胞创伤愈合的模型。
实验方法
(具体方法)
体外培养的单层贴壁细胞生长至融合状态时,人为在融合的单层细胞的中央区域制造出一个空白区域,称为“划痕”,通加入不同浓度的细胞因子(表皮/真皮细胞培养上清中提取)后,在不同的时间点观察并拍照记录不同浓度细胞因子对细胞迁移的影响。在培养过程中,划痕边缘的细胞会逐渐生长入空白区域使“划痕”愈合,通过观察周边细胞的生长迁移能力,区分细胞因子对于划痕区的修复能力,来判断不同处理对于细胞迁移及细胞修复的影响。
(基本步骤)

实验应用
检测贴壁生长肿瘤细胞的侵袭转移能力;研究细胞迁移的体外实验方法;用于研究细胞与细胞外基质、细胞与细胞间相互作用对细胞迁移的影响。
实验结果

不同浓度细胞因子的表皮细胞划痕实验结果
以上是不同浓度的细胞因子对表皮细胞/真皮细胞迁移影响的划痕实验。在相同的时间点,应用细胞因子后,表皮细胞的“划痕”宽度逐渐变小,可见细胞因子的使用能够提高细胞的迁移能力,促进体外划痕的愈合;且随着使用的细胞因子浓度的增加,细胞迁移更快,划痕愈合也更快。
创伤愈合
创伤愈合(Wound healing)是创伤后人体皮肤和表皮组织再生的自然过程。正常来说,皮肤的表皮(最外层)和真皮(内部或深层)存在于一个平衡的状态,以形成一个保护伤口的屏障。而当焦痂破裂,正常的伤口愈合过程便会迅速地开始。其基本过程包括以下阶段:①止血期、②炎症期、③增生期、④成熟及重塑期。
细胞划痕实验可作为体外细胞创伤愈合的模型,用来评估体外创伤愈合的过程。实验结果显示,与对照组相比,不同浓度的细胞因子均可促进表皮/真皮细胞细胞的迁移,使划痕边缘的细胞会逐渐生长入空白区域,使“划痕”愈合,增强对划痕区的修复能力,可用来评估体外创伤愈合的过程。
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细胞因子百科
概念
细胞因子是免疫原、丝裂原或其他刺激剂诱导机体免疫细胞和非免疫细胞产生的低分子量可溶性蛋白质,它们可以调节包括固有免疫和适应性免疫、血细胞生成、细胞生长以及损伤组织修复细胞等细胞的多种生理功能。

细胞因子是一种全新的生物制剂,因其为人体自身分泌,可调节机体的生理过程和提高免疫功能,很低剂量即可发挥作用,疗效显着,副作用小,已成为某些难愈性疾病的新的治疗手段。目前已批准生产的细胞因子多肽药物包括INF-α、INF-γ、Epo、GM-CSF、G-CSF、IL-2、INF-β、EGF等,正在进行临床试验的包括IL-1α、IL-1β、IL-3、IL-4、IL-6、IL-11、M-CSF、SCF、TNF-β等,这些细胞因子的主要适应症包括肿瘤、癌症、贫血、感染性疾病、烧伤、创伤愈合、炎症等。
作用


