间充质干细胞（MSCs）因强大的自我更新能力、多向分化潜能以及免疫调节特性，成为了治疗多种疾病、促进组织修复与再生的关键细胞资源。然而，高效、稳定地扩增MSCs以满足临床研究与应用的巨大需求，是该领域面临的重大挑战之一。
传统的二维（2D）培养体系虽简便易行，但在细胞增殖速度、分化潜能保持及功能性维持等方面存在局限性。鉴于此，三维（3D）培养技术应运而生，为高产量、规模化生产MSCs开辟新途径。中科睿极基于19年的干细胞与再生医学临床转化研究成果，倾力打造的DASEA生物智造平台为3D细胞制备注入新动力。
本案例依托DASEA平台的3D细胞培养策略，聚焦“三维培养提高间充质干细胞产量”的实践探索，展示其如何有效克服传统培养方法的不足，显著促进MSCs的增殖效率、维持细胞活性。
1
实验材料
MSCs、DASEA Ultramedia® pro培养基、DASEA Regencarrier 仿生型微载体、PBS、裂解液（中科睿极）、DASEA Regenbio 全自动3D细胞培养系统（5L 台式生物反应器）
2
实验步骤
使用5L台式生物反应器搭配微载体对MSCs进行培养。
Day 0，微载体加入罐体内与培养基进行充分溶胀，充分溶胀后加入细胞悬液接种模式（间歇搅拌）持续20-28H；
Day 1，补充培养基至工作体积，调节至培养模式（恒速搅拌）；
Day2-5，根据罐体混匀情况，适当调节转速，过程中半换液的形式进行补料；
Day6，收集上清后，罐内细胞在搅拌模式下与裂解液进行孵育，即可继续收获与冻存步骤。
3
实验工艺参数说明
4
反应器控制参数
5
实验结果
在三维培养的加持下，MSCs具备良好的扩增潜力及细胞活率。Day1微载体上细胞接种率可高达100%，在荧光染色拍照下，细胞均匀密集附着在微载体上（图1），最终收获可达2.8*10e9，全过程6天共扩增18倍；并且，在柔性化设备控制策略下，细胞维持在活跃状态，细胞活率一直保持95%以上（图2）。
图1.荧光拍照
图2.细胞扩增数目
总结：本案例展示了中科睿极3D培养策略在细胞扩增上的优势。与传统的2D培养方法相比，3D培养为MSCs提供了更加接近体内环境的生长条件，从而促进了细胞的增殖能力。综上所述，3D培养技术是一种高效、可靠的MSCs生产方法，为干细胞治疗和组织工程提供了一种有效的细胞制备方法。
往期精选
▲ 点击图片，查看原文
