PART01 简介
尽管存在治疗需求且缺乏药物治疗选择,但仍缺乏帮助发现和开发新型疲劳治疗方法的疲劳临床前分析,尤其是在动物模型中。啮齿动物研究中唯一的疲劳临床前试验之一是自愿轮跑活动 (VWRA) 9-15,其中老鼠或其他啮齿动物可以自由使用跑步轮,并记录它们的日常跑步活动。
PART02 实验过程
准备
1、为了在测试前快速识别每只老鼠,在所有老鼠的尾巴上纹身,并用识别标记进行测试。
2、在训练和测试小鼠之前,确保跑步机位于平坦的表面上,并将跑步机设置为所需的倾斜角度并设置电击频率和适当的强度。
3、在跑步机下放置一张干净的屠夫纸或吸水垫,以在训练和测试期间收集粪便和尿液。
4、将一张纸或吸水垫放在距离减震网格最远的跑步机外壳的三分之一处。
5、如果计划在培训期间使用钢丝刷来提供额外的动力,请确保在开始培训课程之前随时可用。确保任何用于诱导和/或减轻疲劳的药物或方法可用
训练老鼠使用跑步机
1、在跑步机关闭的情况下,单独将老鼠的尾巴抬起,并将老鼠放入老鼠跑步机的单独通道中。/2、让老鼠自由探索跑步机 1-3 分钟,或直到每只老鼠探索其车道和/或从网格中收到至少一次冲击。
3、打开跑步机并慢慢提高速度,直到它开始移动。监控所有老鼠以确保它们开始行走。
4、慢慢将跑步机速度提高到 8 m/min。启动计时器并继续监视行为。
5、在 5 分钟时将跑步机速度提高到 9 m/min,在 7 分钟时提高到 10 m/min,并在 10 分钟时停止跑步机。
6、让老鼠短暂探索跑步机,然后将每只老鼠移回笼子。
7、用酒精清洁跑步机和网格,并更换跑步机下方的纸或吸水垫。
8、在培训的第二天,重复步骤 2.1。打开跑步机并将速度提高到 10 m/min。启动计时器。
9、在 5 分钟时将跑步机速度提高到 11 m/min,在 10 分钟时提高到 12 m/min,并在 15 分钟时停止跑步机。取出老鼠并将它们放回笼子。
10、用酒精清洁跑步机和网格,并更换跑步机下方的纸或吸水垫。
跑步机疲劳测试
1、将跑步机速度设置为 12 m/min。不要启动跑步机。确保冲击网格已关闭。
2、单独将小鼠放入跑步机的单独通道中。将每只鼠标放在跑步机上后立即打开相应的网格。
3、同时启动跑步机和秒表。
4、增加跑步机速度。在整个测试过程中仔细观察所有小鼠。
5、如果鼠标连续 5 秒停留在疲劳区,请立即将鼠标从跑步机上移开并记录其运行的持续时间和距离。
6、当跑步机上没有老鼠时,停止跑步机。用酒精清洁跑步机和网格,并更换跑步机下方的纸或吸水垫。
PART03 实验结果
图 1:跑步机疲劳测试,如自愿轮运行,与跑步机运动能力测试相比,可检测接受每日化疗的小鼠的疲劳样行为。
图 2:每周使用 5-FU 治疗会导致小鼠出现类似疲劳的行为。
图 3:重复跑步机疲劳测试期间小鼠的距离跑步和任务顺从性。
PART04 实验总结
在测试过程中,有效且快速地移除满足疲劳标准的老鼠至关重要,因为糟糕的移除技术可能会为老鼠继续奔跑提供额外的动力,从而导致需要测量的不是类似疲劳的行为。虽然具体的移除方法将取决于实验者的舒适度,但一种简单的移除方法涉及使用一只手的食指和中指。在进入跑步机通道之前,每个手指都应保持笔直并略微分开,并在尾巴周围、底部附近或鼠标的后颈上方迅速闭合。一旦牢牢抓住,鼠标就可以很容易地取出。
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