（1）注入镇痛剂。我们使用卡洛芬的单次围手术期给药（4.0-5.0 mg/kg，皮下注射）。
（2）用消毒剂将剃过的皮肤区域从中心到有毛的周边清洁 3 次，并局部注射利多卡因（20 mg/ml）和肾上腺素（5 mg/ml）的混合物进行局部麻醉和血管收缩（以防止过度出血）。
（3）在头皮中线做一个约 2.5 厘米的前后切口，从眼睛之间到耳朵后部。使用 4-6 个斗牛犬钳夹住皮肤并保持切口打开。用抹刀和/或棉签去除任何结膜组织并清洁该区域以暴露颅骨表面。
（4）检查头部是否水平：首先，找到电源模块并将引导套管准确地放在这个位置，接触头骨。记录背腹坐标。接下来，将引导套管完全放在前囟门上，接触头骨，并记录其背腹坐标。这两个坐标应该相同。如果差异 >0.3 毫米，请调整鼻梁进行校正。
（5）使用消毒手钻制作两个小孔，用于固定颅骨螺钉。将两个无菌螺钉放入这些孔中，直到它们被紧紧固定，而不是完全插入头骨。
（6）将引导套管准确放置在前囟门处，记录前后坐标和横向坐标。
（7）将引导套管放置在正确的位置，稍微接触头骨。记录背腹坐标。对于双侧插管放置，在另一半球找到下一个插管位置，并再次记录背腹坐标。两个坐标应相同（或差异 <0.3 mm）。
（8）用无菌铅笔标记头骨上的套管位置，并使用手钻制作毛刺孔，在引导套管的帮助下检查尺寸和正确位置。打好孔后，使用无菌针轻轻地打孔脑膜，以便插管畅通无阻。
（9）将套管放入第一个孔并小心降低，直到达到最终的腹侧坐标。准备牙科水泥并将其大量涂抹在套管和一个或两个螺钉周围，以固定套管。等到水泥完全干燥。之后，通过向上转动背腹杆小心地卸下套管支撑。
（10）将第二根插管放入支架中，然后转到另一半球的插管位置。将套管放入孔中并重复上一步。用水泥覆盖螺钉和插管的大表面，在水泥干燥之前，去除皮肤上的任何多余部分。
（11）注入温热 (~37°C) 无菌生理盐水 (~10 ml/kg, sc) 以确保补液。
（12）水泥完全干燥后，取下套管支架并将无菌针插入每个套管以防止阻塞。
（13）用无菌盐水清洁伤口区域并缝合伤口的正面和背面。
（14）将动物从立体定向装置中取出，更换其鼻子前的气管。继续监测血氧饱和度和体温。
（15）使用吸入式麻醉，并等到动物醒来（约 3分钟）。
（16）将老鼠放入恢复笼中。为避免体温过低，请将笼子放在 28°C 的孵化器中或放在加热垫上，让您可以观察动物至少一小时，然后再将其送回饲养室。
