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学习一下：艾灸对慢性疲劳综合征大鼠肠黏膜屏障修复及疲劳改善作用的研究!

众实科技

2022-08-26

导读：慢性疲劳综合征 ( chronic fatigue syndrome， CFS) 是一种以长期( 超过 6 个月) 且严重的疲劳为主症的神经系统疾病，伴随有胃肠道症状( 腹痛、腹泻和/或便秘)。

众/实/科/技

实

验

分

享

艾灸对慢性疲劳综合征大鼠肠黏膜屏障修复及疲劳改善作用的研究

01-实验介绍

慢性疲劳综合征 ( chronic fatigue syndrome， CFS) 是一种以长期( 超过 6 个月) 且严重的疲劳为主症的神经系统疾病，伴随有胃肠道症状( 腹痛、腹泻和/或便秘)

实验动物

健康雄性 SD 大鼠，体质量 180 ～ 220 g，鼠龄 5～6 周。大鼠自由饮食水，饲养在温度 20～23℃、湿度 40% ～70%的环境中。

主要试剂与仪器

总 RNA 提取试剂；引物; Occludin 兔源多克隆抗体、ZO－1 兔源多克隆抗体、山羊抗兔 IgG－HRP 抗体; 伊红染液、苏木素染液、SDS－PAGE 凝胶制备试剂盒。大鼠实验用细艾条( 7 mm×12 mm)，大鼠跑步机: 北京众实迪创科技发展有限责任公司; LED 灯；音箱; 病理切片机; 显微镜; 酶标仪; 电子天平; 电泳仪、转膜仪; 台式高速大容量离心机; 红外线测温仪:。

设/备/展/示

02-实验方法

制备模型方法为多因素诱导的复合应激方法。应激方式包括跑台训练+束缚应激 +睡眠干扰+拥挤处理 4 种，造模时长 35 d。

动物分组与干预处理

总结

按照随机数字表法，将大鼠分为正常组 12 只和造模组 36 只。CFS 建模成功的大鼠随机分为 3 组，模型组、艾灸 A 组和艾灸 B 组，每组 12 只。继续造模并艾灸 35 d。

方法

①正常组: 正常饲养;

②模型组: 仅捆绑不干预;

方法

③艾灸A组: 温和灸神阙( 脐中央) 、关元穴( 脐下 25 mm) ，距穴位 2. 5 cm 施灸;

④艾灸B组: 温和灸双侧足三里穴 ( 腓骨小头下5mm) ，距穴位 2. 0 cm 施灸。

每次灸 10 min，每日1 次。使用红外线测温仪记录穴位皮肤温度，保证温度在 41～45 ℃。

实验结果

各组大鼠一般情况比较

造模后，大鼠体质量明显降低，摄食水量减少，出现毛发枯槁、精神倦怠、活动减少、耳尾颜色苍白、便质稀软等表现。艾灸组大鼠的体质量、摄食和摄水情况改善不明显，精神状态较活跃，皮毛光泽度恢复，耳尾和爪甲颜色转红，便质成形。

各组大鼠结肠组织病理学观察结果

正常组大鼠结肠黏膜光滑，组织结构基本完整，黏膜细胞间紧密连接，无水肿及炎性浸润。

各组大鼠结肠组织紧密连接 ZO － 1 和 Occludin 蛋白表达检测结果

模型组大鼠结肠组织 ZO－1 和 Occludin 基因的相对表达明显低于正常组( P ＜ 0. 01) 。艾灸组大鼠结肠组织 ZO－1 和 Occludin 的基因表达量显著升高( P＜0. 01) 。两艾灸组分别与正常组比较，均无统计学意义( P＞0. 05) 。同时，艾灸 A、B 组的组间比较也无差异( P＞0. 05) 。