麻醉试剂深度对简单空间学习任务中
小鼠表现的影响

麻醉用于多种程序,包括神经生物学研究(例如,植入电极、施用神经毒素、诱导外伤性脑损伤和其他实验性损伤),随后在行为测试中研究动物,并且它们的表现可能会受到持续效应的影响的麻醉药物。挥发性麻醉已被广泛用于麻醉动物,因为它安全且与快速恢复相关。在老年大鼠麻醉后,先前学习的空间任务的表现受到损害,但在年轻大鼠中有所改善,而在几周内,两个年龄组的新空间任务的获得都受到损害。相比之下,成年大鼠在麻醉后 2 周的学习得到改善,并且训练后重复暴露于安氟醚增强了小鼠的空间记忆。在巴恩斯迷宫中进行测试时,接受重复或单次麻醉程序的小鼠没有立即或长期的空间记忆障碍。虽然引用的研究比较了麻醉和未麻醉的动物,但本研究的目的是评估不同浓度的麻醉对成年小鼠空间学习表现的影响。
我们在 11 个笼子中随机分配了 44 只 10 周龄、本地饲养的雄性 C57BL/6J 小鼠,每个笼子包含 3 到 5 只动物。随意提供水。在限制食物供应之前,小鼠随意喂食啮齿动物颗粒。食物限制在 T 迷宫习惯前 1 周开始。通过每天一次在笼子地板上分发先前分成小块的颗粒来提供有限量的食物。最初,每只小鼠每天接受 2 克;调整这个量,使小鼠保持在 80% 到 95% 的自由进食重量。在整个实验过程中每天对动物称重,以验证它们保持这个体重。将动物饲养在温度(21°C)和湿度(55%)可控的房间内。灯保持在 12 小时 12 小时的循环,下午 5 点关灯
将小鼠随机分为 3 个治疗组:对照组(无麻醉,批次 A 中 n = 8,批次 B 中 n = 6),组 I(1% 试剂,批次 A 中 n = 9,批次中 n = 6 B) 和第 II 组(2% 试剂,批次 A 中 n = 9,批次 B 中 n = 6)。在 T 迷宫测试前 28 小时将小鼠麻醉。将动物单独置于诱导室中,用 5% 试剂在 100% 氧气中以 5 l/min 的输送速率诱导麻醉,直至失去翻正反射。在批次 A 中,诱导后,将动物转移到恒温毯并置于背卧位。然后用 100% 氧气中的试剂维持麻醉,流量为 1。通过连接到同轴电路的面罩给予 5 l/min。当实验室小鼠被麻醉以进行外科手术时,批次 A 的程序复制了典型的临床实践。为了精确控制试剂浓度,批次 B 中的动物在整个麻醉过程中保持在室内;在每只小鼠的右后腿上部放置一个脉搏血氧仪。每隔 10 分钟记录一次脉搏和呼吸频率。在这两个批次中,通过连接到直肠热探头的恒温毯将体温保持在 37°C。动物保持麻醉1小时。在批次 A 中,从面罩内采集气体样本,距同轴麻醉回路中的过渡气体进入气体清除 5 毫米。来自蒸发器的麻醉试剂浓度为 1% 和 2%。使用这种技术,麻醉剂可以在气体清除时与环境空气混合,稀释其浓度。因此,小鼠吸入的浓度可能在蒸发器发出的较高值和药剂气体监测器测得的较低值之间变化,即 0.8% 至 1% 和 1.8% 至 2%。在批次B中,控制排出空气中的试剂浓度;使用了 1% 和 2% 的试剂。在恢复时,所有动物都接受 100% 氧气,直到翻正反射恢复。麻醉期间没有限制小鼠。对照组的动物没有被麻醉;然而,它们被操纵并放置在诱导室内 1 分钟(平均时间直到麻醉动物失去翻正反射)。为了避免非麻醉对照动物的隔离压力,将它们放回自己的笼子里。
2、T 迷宫会议在麻醉程序后 28 小时开始。所有测试均由同一研究人员进行,该研究人员对动物所经历的麻醉程序视而不见。在测试过程中,只有一只选择的手臂被诱饵,这条手臂被认为是正确的手臂。每只动物都被放置在起始臂中,有一扇滑动门阻挡了进入选择臂的通道。前 3 个试验是学习试验,其中老鼠被允许去两个罐子并从正确的手臂上吃掉奖励。在这些学习试验之后,下一个试验试验在以下情况之一发生时结束:鼠标进入未上饵的手臂(错误选择),2 分钟后鼠标没有做出任何选择(没有选择;从未观察到),或者鼠标选择了正确的手臂并吃掉了奖励(正确的选择)。入口被记录为当动物第一次在选定的手臂中拥有所有 4 只爪子时。当试验结束时,将鼠标轻轻推回起始位置。当达到学习标准时,即小鼠在连续10次测试中9次进入正确手臂时(不包括3次学习试验),测试结束;
分析完成任务所需的试验次数以评估小鼠的认知表现。数据表示为平均值±标准差,包括中位数、四分位数和相关时的 95% 置信限。脉搏和呼吸频率通过使用相关t进行分析测试。其他数据通过使用 Bonferroni 事后校正和 2 个因素的单变量方差分析进行分析:治疗(组:对照、低和高异氟醚浓度)和异氟醚输送方法(批次 A 和 B)。定义的极端情况的值位于组框范围之外的 3 个以上四分位数范围内。

