立式高压蒸汽灭菌器系采用预设参数而实现程序升温，维持待灭菌器物处于高温高压状态一定时间，从而达到灭菌的效果。若想实现良好的灭菌效果，应基于如下几个方面进行考量：
灭菌温度、压力保持时间；
灭菌器内部温度分布的均匀程度；
湿热蒸汽的穿透能力；
通常，基于上述条件，在一份完整的设备确认方案中设计的项目为：空载热分布、满载热分布、灭菌效力测试。
空载与满载热分布的不同之处在于是否进行了模拟装载，最终目的是为了确认在灭菌器的腔体内是否能够实现各处温度分布是均匀的，需要对腔体内部不同部位进行布点，布点位置尽量在腔体内均匀分布且尽量覆盖风险点，如温度探头，排水口等位置。
例：立式高压蒸汽灭菌器探头布点：
通常情况下，压力蒸汽灭菌锅升温程序在前期并非是线性的，如下图所示
因此应选取温度稳定区间的数据进行记录，要求：
1）每个探头所测得的温度变化范围不低于设定温度，不超过+3℃
2）不同温度探头之间测得的温度最大最小之差不超过2℃
3）对比温度和压力的一致性
例：从温度稳定开始记录，每隔1分钟记录一次，保证有效的灭菌区间。
F0值在湿热灭菌工艺中有极其重要的意义。F0值在8.0-12.0之间是残余概率灭菌F0值大于12.0认为是过度杀灭。在生产工艺中使用的灭菌器，通常需要F0值来判定灭菌效力，但对于小型灭菌器，通常情况下不需要计算F0值，通过生物指示剂进行灭菌效力的判定。
将染菌量为1106cfu的嗜热芽孢杆菌菌片放置在冷点和较难灭菌部位，（一般的和热穿透试验布点一致）执行灭菌程序，按照规定条件培养，并设置一组阳性和阴性对照。观察培养液颜色变化。
再确认：
缺陷举例
GMP 无菌附录 第六十四条
应当定期对灭菌工艺的有效性进行再验证（每年至少一次）。设备重大变更后，需进行再验证。应当保存再验证记录。