知识盘点 | 抗体保存 Tips
Knowledge Inventory
Antibody preservation
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抗体作为我们免疫学常用的试剂,日常实验少不了它,但它的娇贵程度,又让人咂舌,堪比某神仙水。这样的它,我们又该如何悉心呵护呢?毕竟只有保存好了,实验失败少了,才能在实验上少花钱,又是为实验室省钱的一天~

抗体作为蛋白质试剂,大家都知道保存条件是非常重要的。所以只要保存条件得当,我们的抗体一般都可以保存几个月到几年,这样就不用担心用不完浪费抗体了。
I WANT TO
HAVE A SMALL BEDROOM
CONFORTABLE
Tip 1 - 选择温度
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当拿到抗体的时候,首先不要打开瓶盖,无论是液体还是干粉,先离心,将运输过程中附着在管壁上的抗体离心到底部。有时候抗体量少,无法肉眼观察抗体状态,所以需要先离心沉淀其内容物。
离心之后,我们又该如何保存呢,一般需要分装小份,这样避免反复一管抗体反复冻融和二次污染。我们选择温度,根据抗体来决定,不同公司、不同种类的产品由于产品性质(固态、液态)、产品添加剂(甘油、叠氮钠、牛血清蛋白)的不同,导致储存条件差异。
例如液态抗体,反复冻融会造成蛋白变性和多聚体形成,降低抗体有效浓度及结合能力。未添加甘油,4℃保存,能储存一个月左右;添加了甘油,-20℃保存,能储存一年以上。而冻干粉抗体,稳定性高,可在-20℃、-80℃条件中长时间保存(长达数年),4℃环境也较为稳定。需要注意的是,当冻干粉抗体溶解分装后,保存温度是发生变化的,参考液态抗体保存条件。
CONFORTABLE
Tip 2 - 防止降解
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当抗体稀释到工作浓度之后,需要尽快使用,建议保存于4℃并于一周以内使用。
当然如果需要长期保存,则需用向抗体试剂中加入了牛血清白蛋白(BSA)作为蛋白质稳定剂来防止降解。通常情况下,蛋白质以高浓度保存会更加稳定,不易发生降解和变性,BSA的添加可以让抗体溶液整体的蛋白浓度增加;同时抗体蛋白会被塑料或玻璃材质的管壁吸附,降低有效浓度,加入抗体稳定剂则会通过竞争性结合减少这种吸附效应。
CONFORTABLE
Tip 3 - 防止污染
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抗体作为一种具有活性的大生物分子,需要储存在一个相对稳定的环境,为此我们可以在抗体溶液中加入不同的添加剂以稳定抗体溶液性质。可将叠氮化钠作为抗菌剂加入抗体工作液中,保持最终浓度为 0.02% (w/v),抑制各种微生物的生长,防止抗体溶液染菌,延长抗体保存时间,叠氮钠其本质是呼吸链阻断剂,和氰化物一样可以阻断生物氧化呼吸链的最后一步,从而抑制微生物的产生。
需要注意:叠氮钠由于生物毒性,故不适用于活细胞染色处理和体内实验的抗体。所以必要时可通过透析或超滤除去抗体溶液中的叠氮钠。
@科研老司机:
以上就是小编整理的抗体保存时3个tip,你都记住了吗?善待抗体,就是为自己争取更多的实验时间和省更多的钱,最后祝大家实验顺利,一路绿灯~

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