安捷伦 | 成像应用-使用安捷伦96孔微孔板进行高通量筛选-定量评估血管生成中 TGF-β 信号

安捷伦 96 孔微孔板结合安捷伦Cytation C10 共聚焦多功能成像系统，可对血管生成和增殖在2D和3D 不同生物尺度的 TGF-β 和 BMP 通路活化进行可靠的定量分析。

安捷伦96 孔190 μm薄膜底板微孔板，配合CC10先进的成像仪器和强大的Gen5软件，细胞图像清晰可见、细节丰富，细胞形态、荧光强度，分布情况，可以到精准的记录和分析，提升了实验通量，相同的时间内，得到更多的实验数据，加速筛选的过程。

图2. SMAD磷酸化和亚细胞定位在2D细胞培养物中定量分析。血清饥饿处理后，huFIBs为对照进行处理（A） 或100 ng/mL TGF-β1处理1小时（B），而HUVECs为对照组处理（D）或100 ng/mL BMP-6处理HUVECs 1小时（E）。然后固定细胞并进行免疫染色磷酸化SMAD2/3（pSMAD2/3）（A，B）或磷酸化SMAD1/5/9（pSMAD1/5/9）（D，E），并用Hoechst 34580和AF488 鬼笔环肽复染。

图 3. SMAD4 的表达可在3D 出芽血管生成模型中成像。培养 4 天后，将嵌入纤维蛋白原基质中的 HUVEC 球状体固定并用抗 SMAD4 和抗 PECAM1 抗体进行免疫染色，并用 DRAQ7 复染。（A）血管生出芽的 HUVEC 球状体使用3 x 3 拼接 与Z 轴层叠进行成像。（B） 至 （D） 显示了 （A） 中带有 （B） SMAD4、（C） PECAM-1 和 （D） DRAQ7 信号的插入区域。

安捷伦 BioTek Cytation C10共聚焦多功能成像与安捷伦微孔板，可在不同的生物尺度上对 TGF-β 和 BMP 通路的激活进行的定量分析。