Agilent BioTek Gen5 神经元生长模块基于图像法高通量分析评估神经元生长，为神经生物学家推进神经科学的基础、转化和临床研究提供了重要工具。Agilent BioTek Gen5 神经元生长模块兼容所有安捷伦 BioTek 成像仪为神经元生长分析提供了解决方案。
神经突生长分析能力通过iPSC衍生和原代神经元培养模型的原理验证生长评估来证明。在高通量微孔板格式下进行自动图像收集和分析，可以对具有多个神经突生长特征的神经元培养物进行剂量反应分析。
图2：自动图像捕获，处理步骤和示例免疫细胞化学的结果。
(A) Agilent BioTek Cytation 5细胞成像多模式通过多通道采集自动捕获20倍放大图像。每个井捕获一个3 × 3的图像面板(左图)，图像自动拼接以生成一个大的图像蒙太奇用于分析(中图)。可选的背景减法可以自动应用，以改善神经突过程的可视化(右图)。
(B)低温保存的iPSC衍生神经元培养5天后的多通道图像示例，DAPI核标记(左上)，MAP2抗体(右上)，β-tubulin 抗体(左下)和所有通道的合并图像(右下)。标尺对应200 μm。
图3：基于免疫细胞化学的神经突生长检测对神经元和神经突的优化。
(A) 如图所示，β-微管蛋白和 MAP2 抗体的荧光抗体染色结合 DAPI 核复染的示例图像。为展示之便，所呈现的图像为整个拼接图像的一个子区域。
(B) 与A中的相同图像，叠加了针对β-微管蛋白（左图）和 MAP2 抗体（右图）染色通道的神经元检测结果（黄色实心填充）。所检测到的神经元依据包括核大小以及神经元染色与核染色之间的最小重叠等多项标准进行筛选。
(C) 展示了β-微管蛋白（左图）和 MAP2 抗体（右图）染色的神经突分析结果，同时叠加了神经元（实心黄色填充）和神经突骨架叠加（左图：青色，右图：紫红）。
图 4：iPSC 衍生神经元对生长促进剂和抑制剂的反应。
(A) 板布局显示试验中测试的四种药物的剂量反应曲线。视图显示整个平板上 MAP2 免疫荧光染色拼接的单张图像。
(B) 自动图像分析叠加显示检测到的神经元（黄色）和神经元骨架（青色）。
(C) β-微管蛋白染色评估了四种神经元生长指标，绘制了每种处理的剂量-反应曲线。(D) 通过 MAP2 染色评估四种生长指标，绘制出每种处理的剂量-反应曲线。
图5：低温保存的小鼠大脑皮层培养物对神经元生长效应因子的反应。
(A)自动图像分析显示了三个不同的β-微管蛋白染色的例子，图像中标记到的神经元（黄色填充)和骨架化的神经突(青色线)。
(B)在图像水平上评估β-微管蛋白染色的神经突生长参数的剂量反应曲线，包括四种药物的神经元计数(左图)、神经突总长度(中图)和神经突总分支(右图)。
(C)神经突生长参数的剂量-反应曲线，通过神经突计数(左图)、平均神经突长度(中图)和平均神经突分支(右图)的每细胞平均值来评估。
·· Gen5可拓展-神经分析模块 ··
主要优势
• 优异的神经细胞胞体/神经突分割算法
• 支持无标记神经突起生长分析
• 可计算每个神经细胞的分支数
• 软件操作简便易学
主要检测参数
• 神经细胞体总数/直径/面积等
• 总/平均神经突起长度/面积
• 神经突起厚度
• 单个/平均神经细胞突起数量
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目前可以申请免费试用的机器：
1.安捷伦流式细胞仪型号NovoCyte Advanteon （高通量）
2.安捷伦实时细胞分析 (RTCA)
3.BioTek Cytation 7 活细胞成像系统
4.BioTek Synergy H1 多功能微孔板检测仪
5.汇芯生物EXODUS H600
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