Immunoway | 产品福利-开学季大放送，内参开心领！

在脂肪组织里，β-Actin的表达量非常低，不适合作为内参。

不同组织的细胞结构会有差异性，如脑组织的 tubulin 的表达会高一些（因为神经细胞的轴突和树突都由 tubulin 维持结构），而 actin 的表达量可能会低一些。再比如，骨骼肌、心肌和平滑肌的特殊功能反而导致了 tubulin 的表达改变和特化，这种情况可以选择GAPDH。

缺氧和糖尿病等疾病存在下，会增加 GAPDH 在特定细胞和组织中的表达，不适合做内参。

在加入抗癌和真菌药物时，tubulin表达受影响，不适合做为内参。细胞增殖，毒性，凋亡实验时，Lamin B1等不适合作为内参。没有核被膜的样品是不适合作为内参的。

血红细胞（因为其细胞结构的特殊性和需要携带氧气的功能性）样本就不适合常用内参。可以选用血红细胞的结构性蛋白作为内参代替。

做各种分泌液样本的时候，如血浆，乳汁，组织液等，常用内参不适合。由于没有完整的细胞结构，所以只能选择一些分泌蛋白作为内参，或者采用其他方式作为内参。

做诱导后样本或检测磷酸化等修饰性抗体时，选择结构蛋白作为内参，如 beta Actin 和 beta Tubulin。因为 GAPDH 是代谢类蛋白，表达量有可能会受到诱导处理的影响。

做 Western Blot 实验时，蛋白上样量和内参的条带强度也要适当控制。内参条带不要过度曝光。如果内参条带过度曝光，掩盖样本之间含量差异，妨碍对条带正确强度的判读，进而影响对其他实验结果的判断。