为什么IP实验总被轻重链干扰?
在免疫沉淀(Immunoprecipitation, IP)实验中,传统二抗(如抗小鼠/抗兔IgG二抗)常与 一抗的Fc段结合,但一抗本身是完整的IgG分子(含重链~50kDa、轻链~25kDa)。当用Western Blot(WB)检测IP产物时,二抗不仅会识别目标蛋白,还会与 一抗的重链(Heavy Chain, HC)和轻链(Light Chain, LC) 发生非特异性结合,导致:
❌ 目标蛋白条带被遮挡(与重链/轻链条带重叠,常见于~50kDa和~25kDa干扰条带);
❌ 假阳性信号(非目标蛋白因轻重链结合被误检测);
❌ 数据解读困难(尤其当目标蛋白分子量接近25kDa或50kDa时,几乎无法区分)。

Immunoprecipitating GAPDH in Hela whole cell lysate with mouse anti GAPDH antibody(Catalog YM3029).
Lane 1 (Input): 清晰可见阳性信号.
Lane 2 (-):IgG1 Isotype Control,只存在一抗的轻重链信号.
Lane 3 (+): 除阳性信号外,存在一抗的轻重链信号干扰.
IP专用纳米二抗只识别天然构象的IgG,不能识别变性后的IP抗体重链和轻链,从而有效避免轻重链的干扰。

Immunoprecipitating GAPDH in Hela whole cell lysate with mouse anti GAPDH antibody(Catalog YM3029).
Lane 1 (Input): 清晰可见阳性信号.
Lane 2 (-):IgG1 Isotype Control 无轻重链信号干扰
Lane 3 (+): GAPDH antibody IP (RS0091)除阳性信号外,无轻重链信号干扰.
核心优势:彻底屏蔽轻重链信号
靶向优化:只识目标,不识一抗骨架
••独特表位设计:我们的IP专用二抗 特异性结合一抗的独特表位(非Fc段通用表位),通过特殊偶联技术完全避开了与重链(~50kDa)和轻链(~25kDa)的结合,从源头杜绝轻重链信号的产生。
••实测验证:经IP-WB验证,使用本产品后,25kDa(轻链)和50kDa(重链)条带几乎不可见,目标蛋白条带清晰无遮挡(尤其适用于分子量<30kDa或~45-55kDa的目标蛋白)。
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