壳寡糖对副溶血弧菌抑制作用的研究

副溶血弧菌（ V. parahaemolyticus ）是对虾养殖生产中重要的致病弧菌，发病率高，危害大。研究报道，副溶血弧菌引起对虾红腿病及不同程度的空肠空胃偷死病，给养殖者造成了不小的损失。

据统计，我国华东地区沿岸海水的副溶血性弧菌检出率为47.5%~66.5%，海产鱼虾的平均带菌率为45.6%~48.7%，夏季可高达90%以上。

对于弧菌病的防治，使用化学药物会引起药物残留和抗药性的问题，不仅造成环境污染，而且给食品安全带来危害。

壳寡糖作为一种新型的绿色饲料添加剂，无毒、无副作用，并且可以抑制有害菌，应用前景广阔。本实验选用副溶血弧菌做为研究对象，研究壳寡糖对虾养殖中常见弧菌的抑制效果。

以下实验由集美大学袁香丽，宋凯，王玲，张春晓老师完成于农业部东海海水健康养殖重点实验室。

Part.1

实验方案

配制不同浓度（0%、0.03%、0.06%、0.09%和0.12%）的壳寡糖溶液，菌种活化后，取菌液用生理盐水进行梯度稀释，副溶血弧菌稀释至10 ^-6。

试验时吸取1ml的菌悬液与1ml壳寡糖溶液置于5ml离心管中混匀，放置培养箱37℃培养，分别在0、2、4、6h进行平板涂布，24h后进行菌落计数。

Part.2

结果

不同浓度的壳寡糖对副溶血弧菌数量的影响

由上表可知，不同浓度壳寡糖组随着浓度升高，副溶血弧菌活菌数均有所减少，且随着壳寡糖浓度的升高及作用时间的延长，其对副溶血弧菌的抑制作用增强。

壳寡糖浓度为 0%时，作用时间 0h除外，在任何时间点的活菌落数均显著高于其他添加壳寡糖水平组（P<0.05），作用时间0h，壳寡糖浓度为0.03%时，活菌落数显著高于0.12%壳寡糖组（P<0.05），与其他组差异不显著（P>0.05）；0.09%、0.12%的壳寡糖溶液作用时间在2、4、6h时各组活菌数量显著低于其他组（P<0.05），作用时间为6h时，壳寡糖溶液浓度为 0.09%和0.12%试验组的活菌落数均低于其他各组。

Part.3

结论

本实验中所用壳寡糖（分子量≤2 000 Da，脱乙酰度≥90%，聚合度为 2~8）在体外对凡纳滨对虾致病菌——副溶血弧菌有抑制作用，并且抑菌效果与壳寡糖浓度以及作用时间显著相关。

随着时间的延长及壳寡糖浓度的增加，副溶血弧菌活菌数量减少，呈现出更好的抑菌效果。

以上实验数据来源：

袁香丽，宋凯，张春晓，等.壳寡糖对副溶血弧菌和溶藻弧菌抑制作用的研究(J)饲料工业，2016,37(18):50-54

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