壳寡糖对石斑鱼的生长及肠道菌群的影响
以下为真实实验案例，以供客户和同业人员学习交流探讨。
近年来，水产养殖业高速集约化发展，但也面临着：环境恶化，各种病原微生物引起的疾病频繁暴发等。
为了控制水产上细菌性疾病的发生，养殖者多大量使用化学药物和抗生素，但效果却并不尽如人意。
另外，为了追求经济效益，生产中不断加大放养密度，增加投喂量，以及在饲料中大量使用植物蛋白原料，使鱼类肠道健康受到很大冲击，肠炎频发，肠道消化不良，饵料系数升高的问题非常突出，严重影响了养殖效益。
肠道健康问题已成为制约我国水产养殖业持续健康发展的瓶颈之一，通过营养干预措施改善集约化养殖模式下鱼类肠道功能已经刻不容缓。
壳寡糖作为绿色饲料添加剂，能够维护动物肠道健康，减少细菌通过肠道损伤进入血液导致的疫病发生率，促进营养物质消化吸收，提高饲料利用率，促进动物生长繁殖，提高生产性能等。
Part.1
实验方案
虎龙斑饲喂实验共设 3组，分别投喂添加不同的壳寡糖含量 (0、400、800mg/kg)的实验饲料，每组设 3 个重复，每个重复 30 尾鱼。每天饱食投喂两次 (8:00 和 18:00)，养殖 4 周。
养殖实验结束后，将石斑鱼背部皮下注射制备好的哈维弧菌悬液，7天后每个组别随机选取 4 尾鱼，取前、中、后肠切片，观察头肾组织变化和拍照。
Part.2
结果
1
对生长性能的影响
与对照组 0 mg/kg 相比，800 mg/kg 组的饲料系数 (FCR) 为最低 (P < 0.05)。
各组石斑鱼在实验期间有少量死亡，成活率均> 94.00 %，组间差异不显著 (P > 0.05)。
2
对肠道菌群的影响
不同剂量壳寡糖饲喂虎龙斑的肠道细菌群落的相对丰度柱状图
各组样品在门 (phylum) 一级水平的细菌群落相对丰度没有出现显著差异。
基于种一级分类阶元，不同分组的细菌类群为相对丰度前 15 的聚类热图
通过分类阶元为种 (spe-cies) 一级水平的 OTU 注释，绝大多数优势物种为益生菌，如格氏乳杆菌 (Lactobacillus gasseri)、罗伊氏乳杆菌 (Lactobacillus reuteri) 和长双歧杆菌(Bifidobacterium longum subsp. longum)。
格氏乳杆菌在 800 mg/kg 组别的后肠样品丰度最高，其次是 800 mg/kg 组别的中肠样品，其余样品中的丰度均较低。
一些条件致病菌，如杀香鱼假单胞菌 (Pseudomonas plecoglossicida)在对照组的中肠样品中丰度最高。
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结果显示，0和800这两个组别的细菌群落可以明显分开，说明800处理组与0对照组有明显的微生物群落多样性差异。
肠道菌群的主坐标分析
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哈维弧菌感染实验
感染哈维弧菌后，对照组实验鱼前肠皱襞上出现黏膜脱落、断裂现象，细胞界限不清晰；中肠皱襞形状萎缩呈畸形；后肠皱襞内部空洞化，高度减小，肠壁变薄。
与对照组相比，800 mg/kg 分组的不同部位的肠道结构最完整，无黏膜断裂，其中杯状细胞紧密排列在皱襞外缘下，且杯状细胞和嗜酸性粒细胞数量有明显的增加。
Part.3
结论
结果表明饲料中添加适宜的壳寡糖能显著提高鱼体生长性能，提高鱼体肠道中定值的有益菌丰度，降低病原菌的比例，调节肠道菌群结构。减少弧菌感染对肠道的损伤，显著地提高其存活率。
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