外泌体表征新方法——冷冻电镜
外泌体是所有细胞产生的胞外小泡,直径为30-100nm,脂质包裹体结构,携带核酸、蛋白质、脂质和代谢物。外泌体在肿瘤诊断、迁移生长、组织损伤修复、免疫抗原呈递及神经退行性疾病中起着极其重要的作用,同时,外泌体作为疾病治疗药物运送载体的研究也在不断发展。
外泌体属于细胞外囊泡(extracellular vesicles,EVs)的一种。根据粒径大小和生成机制的不同,EV主要分为凋亡小体、微囊泡和外泌体三类。EV具有诊断和治疗疾病(包括癌症、神经和心血管疾病)的潜力。因此,研究人员正在积极探索EV作为治疗靶点、生物标志物、新型药物递送剂和独立疗法的应用。
电镜是科学研究中进行原子和分子尺度表征的重要工具。冷冻电镜是电子显微镜的衍生技术,在冷冻电镜的成像过程中,生物样本被封装在薄层玻璃态冰中,在电子束辐照下,仍处于原始结构和本征状态。
在外泌体和EV的分析中,最难的是将其与具有相同大小和形状的其他颗粒区分开来。冷冻电镜可以直观地看到它们的内部和外部结构,从而区分出不同的颗粒。
除此之外,冷冻电镜还可提供外泌体及EV的圆度、形貌、尺寸分布、内部体积或负载能力等信息。
相比于其他的表征技术手段,冷冻电镜可以做到直接、可视化的对样品进行观察,使表征数据更具有说服力;同时,一次表征多种指标,减少了对外泌体和EV样品的消耗,降低了表征检测的成本。
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