标准解读丨首个mNGS性能确认国家标准正式发布！

核心定位：规定临床实验室mNGS检测性能确认的相关要求，确保检测系统满足临床预期用途。

适用范围：适用于临床检验实验室使用高通量测序技术开展mNGS的性能确认；不适用于生物纳米孔、固态纳米孔等为主要技术原理的单分子病原测序，也不适用于采用靶向探针杂交捕获或多重引物扩增技术建立的病原测序。

实验室需严格遵循预期临床用途所涉及的标本类型和病原谱，制备性能确认标本，标本分为临床标本、模拟阳性标本和计算机模拟测序数据三类，用途明确：临床标本为理想确认标本，无法获取足够阳性临床标本时可采用模拟阳性标本替代；模拟阳性标本不可用于建立临界值、准确度性能确认；计算机模拟测序数据仅用于生物信息学分析流程的性能确认。

针对mNGS全流程5个核心环节，标准明确了具体操作要求，核心内容如下：

1. 标本采集运输及保存：对不同温度、时长、冻融次数等条件进行验证，每种条件重复3次检测，统计符合率≥95%的条件，明确标本稳定转运和保存的相关性能；

2. 核酸提取与文库制备：同批次重复检测≥6份、不同批次/操作员≥3份，验证纯度、重复性及文库质量；

3. 测序仪器及试剂：使用溯源完备的标本/标准菌株，重复3次上机测序，验证测序覆盖率、准确率等核心参数；

4. 生信分析流程：监控批次内、批次间实验室背景污染，建立ROC曲线，通过约登指数确定最优检出临界点，验证准确率、召回率等参数；

关键环节完成后需开展综合验证，核心量化指标如下：

1. 精密度：同批次试剂对阳/弱阳/阴性标本至少5批次检测，每批次每种标本重复≥3次完整检测，重复性阴阳性符合率≥95%；

2. 最低检出限（LoD）：即LoD95%（95%阳性检出率对应的浓度），LoD附近标本≥20份重复验证，明确不同物种LoD；

3. 稳定性：试剂反复冻融/保存后，检测阳/弱阳/阴性标本，结果符合率≥95%，明确稳定保存条件；

4. 分析特异性：干扰试验重复≥3次，符合率≥95%；将近缘物种按不同浓度混合检测，明确交叉率；

5. 准确度：与参考方法（或临床病原学诊断）比对，比较方法需获得至少50例阳性标本和50例阴性标本，计算敏感性和特异性。

报告需包含预期用途、检测系统、原始数据、局限性四大核心要素；其中局限性需覆盖病原体和标本类型两个层面，未完成性能确认的病原体和标本类型视为无法准确检出，可疑阳性结果需用PCR或Sanger测序法复核。标准自2027年1月1日实施。

昇汇因源将以本次国家标准发布为契机，深入践行GB/T 46943-2025要求，坚守质量底线，依托自身技术与临床经验，持续深耕mNGS检测领域，优化全流程服务，赋能临床诊疗，与行业同仁共赴标准化新时代。