第五届兽医检测诊断大会会议笔记（三）|周智研究员：2018-2023年，6年监测12个省份的原种猪场检测到欧洲型PRRSV

      周智研究员首先介绍了猪感染蓝耳病之后的三大临床症状：

      一是引起母猪的繁殖障碍，比如母猪妊娠后期发生流产、早产、死胎和木乃伊胎等；

      二是引起猪的呼吸道疾病，猪只发烧呼吸困难、咳嗽等；

      三是猪群免疫功能下降，易继发感染细菌性和病毒性疾病，比如传染性胸膜肺炎、链球菌、附红细胞体、支原体等感染。

      随后，周智研究员详细介绍了猪蓝耳病的流行和发展史，如下图所示。

      不同的蓝耳毒株在进行和遗传上表现出不一样的基因特征：

      类NADC30毒株的Nsp2基因缺失131个氨基酸，具体为111-aa（323-433）+1-aa（481）+19-aa（533-551）。此外类NADC30的Nsp2氨基酸缺失模式与NADC30相同，与美国2008年分离的NADC30毒株亲缘关系最近，推测该毒株经美国传入我国后经历了不同程度的变异和演化。

      通过不同类NADC30毒株的遗传演化分析发现：基因重组多变是NADC30毒株的显著特征，并且重组毒株和重组区域类型多样，基因重组最易发生的区域是NSP9和ORF2-ORF4，在临床上出现很多类NADC30的变异毒株，进一步增大了临床毒株间重组的风险。

      NADC34毒株的基因特征为：

      非结构蛋白Nsp2，存在100个氨基酸的缺失，通过遗传分析表明，目前我国NADC34毒株与美国Sublineage 1.5 毒株同源性最高，未形成独立分支，表明国内毒株的扩散可能和从国外引种相关。

      此外通过连续的监测发现，欧洲型蓝耳病毒在我国广泛流行，连续6年在原种场或临床样本中均监测到了欧洲型蓝耳病毒。

      通过与欧洲株LV相比，我国欧洲型蓝耳毒株在Nsp2存在12种缺失模式，而357-360位+411位氨基酸缺失是出现频率最高的缺失类型。

      此外，欧洲型蓝耳病毒基因组高变区的序列分析发现，ORF3/ORF4重叠区域变异导致的GP3、GP4氨基酸发生变化，与经典LV株相比，我国欧洲株的GP3、GP4氨基酸各有7种缺失模式，其中2种出现频率较高，表明欧洲型蓝耳毒株在临床上发生变异的可能性也较大。

      综合来讲，目前蓝耳毒株的流行现状是多毒株、多类型。以自然毒株为代表的经典CH-1a、HP-PRRSV（高蓝）、NADC30、NADC34、QYYZ、LV等；以活疫苗为代表的VR2332、CH-1R、R98、JXA1-R等。由于蓝耳毒株多样，导致猪场蓝耳临床感染复杂多样，不同的猪场流行毒株存在差异，还存在不同毒株混合感染等情况，加大了猪场防控蓝耳的压力。 

      为了评估蓝耳在猪场内的感染状态或流行情况，需要我们选择合适的采样方法，现在各猪场基本都有兽医分子实验室，借助于荧光PCR的方法，针对不同猪群、不同日龄，可快速鉴别诊断蓝耳病原，同时结合抗体监测，评估猪群的免疫或感染后的抗体水平。

1、当前蓝耳毒株种类繁多，如以自然毒株为代表的经典CH-1a、HP-PRRSV（高蓝）、NADC30、NADC34、QYYZ、LV等；以及活疫苗为代表的VR2332、CH-1R、R98、JXA1-R等。

2、目前国内类NADC30毒株逐渐成为优势毒株，欧洲型蓝耳检出率上升。

3、蓝耳毒株变异速度快，还可能发生重组、缺失，进一步加大了蓝耳防控的压力。

4、兽医实验室可根据不同日龄、不同感染状态的猪群，制定相应的监测和检测计划，通过荧光定量PCR的方法，实现蓝耳毒株的快速鉴别和诊断。