基于UPLC特征图谱和一测多评法的马鞭草质量评价及其标准汤剂量值传递规律研究- 大数跨境

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基于UPLC特征图谱和一测多评法的马鞭草质量评价及其标准汤剂量值传递规律研究

天然产物研究与开发

2023-09-19

导读：本研究建立了马鞭草UPLC特征图谱和5-羟基马鞭草苷、马鞭草苷及毛蕊花糖苷含量的一测多评分析方法。

杨晓东罗宇琴吴文平潘礼业刘晓琳庞伟邢菊玲李国卫*

广东一方制药有限公司广东省中药配方颗粒企业重点实验室

前言

马鞭草为马鞭草科植物马鞭草Verbena officinatis L.的干燥地上部分，始载于《名医别录》，列为下品。马鞭草的化学成分主要为环烯醚萜苷类、黄酮类、甾醇类、三萜类、多酚类和挥发油、鞣质、β-胡萝卜素，咖啡酸，糖类等。主要活性成分为环烯醚萜苷类成分。其性凉，味苦，归肝、脾经。具有活血散瘀、解毒、利水、退黄、截疟的功效。临床用于癥瘕积聚，痛经经闭，喉痹，痈肿，水肿，黄疸，疟疾。马鞭草资源丰富，其中环烯醚萜苷类成分具有抗氧化、保肝、保护神经、保护心脏及脑缺血、抗炎等多种作用。中药汤剂(标准汤剂)是中医临床最常用的中药复方制剂，也是中医历史上应用最久和最广的制剂。无论是中药传统饮片，还是破壁饮片、中药配方颗粒等中药新型饮片，均是采用水煎服或者水冲服，因此，将标准汤剂研究作为其他中药制剂研究的首选对照具有十分重要的意义。本研究通过阐明饮片到标准汤剂的量值传递规律，为马鞭草中药制剂工艺研究和质量评价奠定基础。

本研究以马鞭草饮片为研究对象，建立其UPLC特征图谱，结合化学模式分析图谱信息并采用超高效液相色谱法联合一测多评法同时测定马鞭草中毛蕊花糖苷、5-羟基马鞭草苷、马鞭草苷含量的方法，与外标法测定结果进行比较。并测定其标准汤剂出膏率、毛蕊花糖苷、5-羟基马鞭草苷及马鞭草苷含量，计算转移率，以此为基础进行马鞭草饮片到标准汤剂的量值传递研究，说明各项质量指标设定的合理性。

代表性结果

讨论与结论

马鞭草样品特征图谱等度洗脱无法实现基线分离，故采用梯度洗脱，在前期预实验中，本研究对比了甲醇-水、乙腈-水、乙腈-0.1%磷酸溶液、乙腈-0.05%磷酸溶液等流动相，最终选定乙腈-0.05%磷酸溶液为流动相，在上述色谱条件下，色谱峰分离度、理论板数及峰型等参数均较好。本研究借助单因素实验系统考察了提取溶剂、提取方法及时间、料液比对提取效率的影响，结果显示，当提取溶剂为80%甲醇、料液比为1:50(g/mL) 、回流提取120分钟时，提取效率最高，故以上述方法为马鞭草饮片的提取方法。

中药多指标成分整体质量控制已成为中药质量控制必然发展趋势，特征/指纹图谱是一种有效的质量评价方法，将其与一测多评分析方法相结合可实现质量评价的整体性和准确性。本研究建立了马鞭草饮片UPLC特征图谱，确定了5个特征共有峰并指认了其中3个成分，分析时间比HPLC有明显缩短，且色谱条件可用于5-羟基马鞭草苷、马鞭草苷及毛蕊花糖苷含量测定。对特征峰峰面积进行主成分分析，该主成分综合评价模型进一步完善了马鞭草质量评价分析方法。

2020年《中国药典》中马鞭草的含量测定指标为齐墩果酸和熊果酸总量，均为三萜类化合物，极性小，水溶性较低，前期实验研究结果显示，马鞭草标准汤剂中齐墩果酸和熊果酸的总含量低于2.0mg/g，转移率低于6%。因此，基于特征图谱，建立了5-羟基马鞭草苷、马鞭草苷及毛蕊花糖苷3种成分含量一测多评测定方法。马鞭草的极性成分以环烯醚萜类物质为主，其中马鞭草苷和5-羟基马鞭草苷为含量最高的主要成分，标准汤剂转移率较高。部分批次转移率超100% ，而5-羟基马鞭草苷、马鞭草苷总量的总转移范围在56.6%～91.2%。可能原因为同类成分在加热煎煮等过程中发生结构转化。18批马鞭草标准汤剂中毛蕊花糖苷、5-羟基马鞭草苷和马鞭草苷含量和转移率批间存在差异，可能与饮片含量、饮片的质地有关，部分饮片颜色较浅，存放时间较久，炮制时，碎屑较多，可能是导致其含量和转移率波动较大的原因。所选的3种成分在马鞭草中含量较高，在抗氧化、保肝、保护神经、保护心脏及脑缺血、抗炎等方面具有较好的药理活性，是马鞭草发挥药效的主要物质基础之一。

一测多评法测定结果与外标法测定结果无明显差异，可用于马鞭草中多种成分定量分析。UPLC特征图谱结合多指标成分一测多评定量分析法可为马鞭草及马鞭草中药制剂工艺研究和质量评价提供参考。该研究成果发表在《天然产物研究与开发》2023年第8期，欢迎引用(点击左下方“阅读原文”可查看全文)。

引用格式：杨晓东,罗宇琴,吴文平,等.基于UPLC特征图谱和一测多评法的马鞭草质量评价及其标准汤剂量值传递规律研究[J].天然产物研究与开发,2023,35:1393-1401. Yang XD,Luo YQ,Wu WP.et al.Quality evaluation of Verbenae Herba based on UPLC characteristicchromatogram and QAMS and the transmission law ofquantity value of its standard decoction[J].Nat Prod Res Dev,2023,35:1393-1401.